大腸癌に対するがん免疫療法における革新的治療予測バイオマーカーの探索

寻找结直肠癌癌症免疫治疗中的创新治疗预测生物标志物

• 批准号: 22K16491
• 负责人: 清住 雄希
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16491/
• 关键词: 大腸癌; MSI-H; 癌免疫療法; 免疫チェックポイント阻害薬; IDO1; 免疫療法; バイオマーカー

大腸癌における治療効果バイオマーカー探索のため、まず大腸癌症例979例の臨床病理学的因子を調査した。StageIV症例198例を含む手術療法、化学療法症例の予後を解析し、免疫染色を行うためのサンプルづくりを実施した。本研究において解析する因子についてもこの時点で整理した。まず、免疫学的背景を分類するため、以前の研究より当科で行っているCD3、CD4、CD8、FOXP3の免疫染色を行い、ハイブリッドセルカウンター、BZ-Xを用いて陽性リンパ球数のカウントを行った。こちらは腫瘍先進部３視野のリンパ球数の平均値を算出する方法で、データごとの差異が最小限にとどまるよう工夫し、これまでも同様の手法を用いて報告している。腫瘍浸潤リンパ球数と予後の関連性を解析すると、CD3、CD8、FOXP3低発現群で有意に予後が不良であるという結果が得られ、一方でCD4陽性リンパ球においては有意差を認めなかった。これらの解析と並行して、大腸癌肝転移症例181例を抽出しており、現在DNA抽出、real-time PCR、免疫染色などの実験準備を進めている。次に、本研究の中核的解析であるMSI-H症例の探索を行った。大腸癌組織の凍結標本よりDNAを抽出し、ベセスダ分類に則ってBAT25、BAT26というMSIのマーカーを用いたPCRを行い、DNAシークエンサーで解析を実施した。Microsatelliteの反復回数に変化がある症例をMSI症例、変化がない症例をMSS症例とし、256例の解析を行った。256例中、MSI-Hの結果を得たものは30例（11.7％）であり、過去の報告に合致する結果が得られた。現在、本研究結果に基づき、MSI-H群 vs MSS群に分類し、臨床病理学的特徴の解析、前述の腫瘍浸潤リンパ球数との関連性について解析を進めている。

The therapeutic effect of colorectal cancer was investigated by the のため and the clinical pathological factors of 979 cases of colorectal cancer were investigated. 198 cases of Stage IV cases were treated with surgical treatment, cases of chemotherapy were analyzed after treatment, and immunostaining was performed. This study focused on analyzing factors and organizing time points.まず, Background of Immunology Classification するため, Previous Research より达科で行っているCD3, CD4, CD8, FOXP 3. Immunostaining, ハイブリッドセルカウンター, BZ-Xを Use the いてpositive リンパball number のカウントを行った.こちらはThe advanced part of the tumor ３field of viewのリンパThe average value of the number of balls のをThe method of calculating するで、データごとのThe difference is the minimum limit, the minimum limit is the time, the technique is the same, and the report is the same. Analysis of the correlation between the number of infiltrated tumors and postoperative treatment, and the analysis of the correlation between the number of tumors and the presence of low levels of CD3, CD8, and FOXP3. After that, the result of the bad test was the result, and the CD4 positive test result of one party was the difference.これらのanalytics and parallel して, 181 cases of colorectal cancer liver metastasis, しており, now DNA extraction, real-time PCR, immunostaining などの実験 preparation を入めている. Next, the core analysis of this study is the exploration of MSI-H cases. Frozen specimens of colorectal cancer tissue are extracted and classified, and DNA is extracted and classified. BAT25, BAT26というMSIのマーカーをUsing いたPCRを行い、DNAシークエンサーでanalyticsを実时时た. Microsatellite's recurring number of cases is the case of MSI, the case of the disease is MSS, and the analysis of 256 cases is performed. Among 256 cases, the results of MSI-H were correct in 30 cases (11.7%), and the results of past reports were correct. Now, the results of this study are based on the classification, MSI-H group vs MSS group classification, clinical pathology analysis, and the above-mentioned tumor infiltration ball number and correlation analysis are in progress.