心停止蘇生後病態における自然免疫調整機構の解明と新規免疫調整療法の開発

阐明心脏骤停复苏后病理状态下的先天免疫调节机制并开发新的免疫调节疗法

• 批准号: 22K16632
• 负责人: 多村 知剛
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16632/
• 关键词: 心停止蘇生; 脳障害; NKT細胞; 免疫調整療法; 心停止; 蘇生

心停止蘇生は全身の虚血再灌流傷害を起こす。虚血再灌流傷害は非感染性の全身性炎症反応を惹起し、その炎症の制御には免疫機構が深く関与することが知られている。単一臓器の虚血灌流障害モデルにおいては、自然免疫細胞のナチュラルキラーT（NKT）細胞が重要な役割を果たすことが報告されているが、NKT細胞が心停止蘇生後の病態に担う役割は明らかでない。本研究の目的は、心停止蘇生後の脳機能障害にNKT細胞が関与しているか、またそのメカニズムについてマウス心停止モデルを用いて明らかにすること、さらには院外心停止蘇生後患者で臨床的相関を確認し、新規免疫調整療法の開発を目指すことである。心停止蘇生6時間後にはマウス血漿中のNKT細胞の抗原であるスルファチド脂質が上昇すること、心停止24時間後にはスルファチド反応性NKT細胞が脳に浸潤することが明らかとなった。心停止蘇生後にスルファチドを静注することでも生存率と脳機能スコアが改善することがあきらかとなったが、心停止18時間前にスルファチドを腹腔内投与する方法の方が効果が高いことが明らかとなった。この心停止前投与を用いて、心停止24時間後の脾臓中のNKT細胞の表現型をフローサイトメトリーを用いて検討した。結果、スルファチド反応性NKT細胞の活性化マーカーであるCD69と転写因子PLZFの発現が上昇していた。さらにケモカイン受容体の発現も上昇していたが細胞傷害活性の指標であるパーフォリン、グランザイムには変化を認めなかった。また、スルファチドの投与はNK細胞数に影響を与えないが、NK細胞中のインターフェロンγの発現は減少した。

心脏骤停复苏会导致全身性缺血再灌注损伤。缺血 - 重新灌注损伤会触发非感染的全身性炎症反应，并且众所周知，免疫机制与控制炎症深深相关。在单个器官中缺血 - 灌注损伤的模型中，据报道，天然杀伤剂T（NKT）先天免疫细胞的细胞起着重要作用，但是NKT细胞在心脏骤停复苏后的病理学中起着作用，尚不清楚。这项研究的目的是阐明心脏骤停复苏后NKT细胞是否参与脑功能障碍，并使用小鼠心脏骤停模型进行了机制，并进一步证实了院外心脏骤停恢复后患者的临床相关性，并开发新的免疫调节治疗。据显示，硫化物脂质，小鼠血浆中NKT细胞的抗原，心脏骤停后6小时增加，硫化物反应性的NKT细胞在心脏骤停后24小时浸润大脑。据透露，心脏骤停复苏后的静脉硫化物输注也提高了存活率和脑功能评分，但据显示，心脏骤停前18个小时腹膜内施用硫化物更有效。使用流式细胞术后24小时，使用该脾脏在脾脏中检查NKT细胞的表型。结果，CD69的表达是硫化物反应性NKT细胞的激活标记和转录因子PLZF的表达。此外，趋化因子受体的表达也增加了，但在穿孔蛋白或颗粒酶中未观察到这是细胞毒性活性的指标。此外，尽管硫化物给药不影响NK细胞的数量，但干扰素γ在NK细胞中的表达降低。

项目成果

救急患者のバイオバンクを起点として転帰改善を目指すトランスレーショナルリサーチ

旨在以急诊患者生物库为起点改善治疗结果的转化研究

• 发表时间: 2022
• 作者: Nanae Takahashi;Norio Akaike;Tomohisa Nagamatsu;Hiroyuki Uchino;Yoshihisa Kudo;Nanae Takahashi;Yo Sato;佐藤 洋;多村知剛
• 通讯作者: 多村知剛