メソトレキサート耐性中枢神経原発悪性リンパ腫に対する新規治療標的の探索

寻找甲氨蝶呤耐药的原发性中枢神经系统恶性淋巴瘤新的治疗靶点

• 批准号: 22K16691
• 负责人: 藤本 健二
• 金额: $ 2.33万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16691/
• 关键词: 中枢神経原発悪性リンパ腫; メソトレキサート耐性; PDXモデル; メソトレキサート; 治療抵抗性

悪性脳腫瘍である中枢神経原発悪性リンパ腫（PCNSL）の標準治療は大量メソトレキサート（HD-MTX）療法を基盤とする化学療法と、それに続く放射線療法である。一旦寛解しても再発率は非常に高く、その際にはHD-MTX基盤化学療法を再チャレンジすることが多い。本研究ではPCNSLの細胞株やPatient-derived xenograft (PDX)モデルを作成し、それを用いてMTX耐性モデルを確立し、その耐性機序を明らかにし、さらにMTX耐性獲得後のPCNSLに対する新規治療法を開発することを目的とする。今年度はPCNSLの細胞株やPDXモデルを作成することを目的とした。細胞株に関しては、手術検体から直接in vitroでの培養を試みた。培地を複数種類用いて、細胞の増殖の有無を調べたが、現時点でin vitroで培養可能な新たな細胞株樹立には至っていない。またPDXモデルに関しては、手術検体を手術室から直接動物実験施設に搬入する手順を確認するのに時間を要した上、マウス脳内にPCNSL検体を移植する人員の不足により、PDXモデルの作成に遅れが生じた。移植できなかった分のPCNSL検体はcell bankerにて凍結保存し、次年度にPDXモデル作成に用いることとした。また、今後PDXモデルを用いてMTX耐性モデルを確立する予定としており、その後はRNAシークエンス等を用いて、MTX耐性PCNSLに高発現している分子を同定する予定としている。今年度の凍結サンプルやFFPEサンプルはHD-MTX基盤化学療法に奏功したか否かの臨床情報等も併せて全て収集しているため、その結果のValidationに用いることが可能である。

The standard treatment of the central nervous system (PCNSL) includes a large number of drugs (HD-MTX), chemical methods, radiation methods, and so on. Once you understand that the rate of reproduction is very high, the chemical method of HD-MTX is very high, and then there are many problems. In this study, the PCNSL cell strain Patient-derived xenograft (PDX) was successfully established, the MTX tolerance test was established, the sequence of PCNSL tolerance was confirmed, and the PCNSL tolerance was obtained. This year, the PCNSL cell line, the PDX cell line, has been made into a target for this year. Direct in vitro training of cell strains and technical devices will be carried out. It is possible to replicate several types of cell culture, cell culture has no cell culture, and in vitro culture at some point may cause new cell strains to be isolated to cell culture. The direct equipment equipment of the PDX and the mobile phone room will be transferred to the mobile phone to make sure that there is a shortage of personnel for the PCNSL body transplant in the mobile phone, and that the PDX will become a health care unit. Transplantation is divided into three parts: PCNSL, cell banker, save, and next year's PDX. In the future, the PDX tolerance test will make sure that the predetermined MTX tolerance is determined, the MTX tolerance PCNSL is high, and the MTX tolerance is high. This year, we will learn more about the chemistry of FFPE. This year, we will learn whether or not to have sex, and so on. The results of this year's Validation show that it is possible to have sex problems.