メカノレセプターTRPV4による椎間板変性に対する治療アプローチ

机械感受器TRPV4治疗椎间盘退变的方法

• 批准号: 22K16743
• 负责人: 武岡 由樹
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16743/
• 关键词: TRPV4; 椎間板髄核細胞; オートファジー; 細胞外基質代謝; 椎間板変性; 細胞外基質

本研究の目的は、ラット椎間板においてTransient receptor potential vanilloid-4 (TRPV4)の抑制および活性化が恒常性維持、すなわちオートファジーと細胞外基質代謝に与える影響を明らかにすることである。2022年度はラット尾椎椎間板髄核細胞を用いて細胞実験を行った。機能欠失実験ではTRPV4 siRNAをリバーストランスフェクション法で細胞に導入し、炎症刺激(IL-1β添加）条件下で、タンパクを抽出してオートファジーマーカーや細胞外基質同化因子・異化関連因子をウェスタンブロット法で評価した。TRPV4の抑制により、オートファジーの有意な抑制（p62/SQSTM1の低下とLC-IIの増加）と、細胞外基質同化因子（Aggrecan, Collagen type II, TIMP1, TIMP2）の有意な減少、異化関連因子（MMP3, MMP13）の有意な増加を認めた。また、TUNEL染色を用いた細胞生存率の評価では、TRPV4抑制により細胞生存率の有意な低下を認めた。機能獲得実験では、TRPV4アゴニストを添加して細胞を培養し、同様に炎症刺激条件も設けて、オートファジーと細胞外基質の評価をウェスタンブロット法で行った。炎症刺激下において、アゴニストによるTRPV4の活性化によりオートファジーマーカーの有意な増加を認め、細胞外基質同化因子の有意な増加と、異化関連因子の有意な低下を認めた。さらに、アポトーシスマーカーを評価し、アポトーシスの抑制（Cleaved PARP, Cleaved Caspase 9の低下とPARPの増加）が示された。

は の purpose, this study ラ ッ ト intervertebral disk に お い て Transient receptor potential vanilloid 4 (TRPV4) の inhibit お よ び activeness が constancy maintain, す な わ ち オ ー ト フ ァ ジ ー と に and extracellular matrix metabolism え る influence を Ming ら か に す る こ と で あ る. In 2022, ラット ラット caudal intervertebral plate medullary nucleus cells を were experimentally performed using を て cells った. Function owe loss be 験 で は TRPV4 siRNA を リ バ ー ス ト ラ ン ス フ ェ ク シ ョ ン に import し で cells, inflammatory stimulation (IL - 1 beta add) under the condition of で, タ ン パ ク を spare し て オ ー ト フ ァ ジ ー マ ー カ ー や extracellular matrix assimilation factor, alienation masato even factor を ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ ト method で review 価 し た. TRPV4 <s:1> inhibition によ, <s:1> トファジ <s:1> <s:1> な inhibition (p62/SQSTM1 is decreased とLC-II is increased) と, extracellular matrix assimilation factor (Aggrecan, Collagen type II, TIMP1) TIMP2) <s:1> intentionally な decreased, and the dissimilation correlation factor (MMP3, MMP13) <s:1> intentionally な increased を recognized めた. ま た, TUNEL staining を い た cell survival の review 価 で は, TRPV4 suppression に よ り cell survival rate low の intentionally な を recognize め た. Function get be 験 で は, TRPV4 ア ゴ ニ ス ト を add し て cells を し, with others in に inflammation stimulation condition も if け て, オ ー ト フ ァ ジ ー と extracellular matrix の review 価 を ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ ト line method で っ た. Inflammatory stimuli に お い て, ア ゴ ニ ス ト に よ る TRPV4 の activeness に よ り オ ー ト フ ァ ジ ー マ ー カ ー の intentionally な raised を recognize め, extracellular matrix assimilation factor の intentionally な raised と, alienation masato even low factor の intentionally な を recognize め た. さ ら に, ア ポ ト ー シ ス マ ー カ ー を review 価 し, ア ポ ト ー シ ス の inhibition (Cleaved PARP, Cleaved Caspase 9 low の と PARP の rights) が shown さ れ た.

项目成果

Transient Receptor Potential Vanilloid 4 (TRPV4) knockdown decreases extracellular matrix synthesis via autophagy suppression in rat intervertebral disc

瞬时受体电位 Vanilloid 4 (TRPV4) 敲低通过抑制大鼠椎间盘自噬减少细胞外基质合成

• 发表时间: 2023
• 作者: Tomoya Matsuo;Yoshiki Takeoka;Zhongying Zhang;Takashi Yurube;Kunihiko Miyazaki;Hiroki Ohnishi;Masao Ryu;Naotoshi Kumagai;Kohei Kuroshima;Yoshiaki Hiranaka;Ryosuke Kuroda;Kenichiro Kakutani
• 通讯作者: Kenichiro Kakutani

ラット椎間板においてTransient Receptor Potential Vanilloid 4 (TRPV4)がオートファジーと細胞外マトリクス合成へ与える影響

瞬时受体电位 Vanilloid 4 (TRPV4) 对大鼠椎间盘自噬和细胞外基质合成的影响

• 发表时间: 2023
• 作者: 松尾智哉;武岡由樹;張鍾穎;由留部崇;宮崎邦彦;大西洋輝;劉正夫;熊谷直利;黒島康平;平中良明;黒田良祐;角谷賢一朗
• 通讯作者: 角谷賢一朗

Transient Receptor Potential Vanilloid 4 (TRPV4) activation promotes autophagy and increases extracellular matrix synthesis through AMPK pathway in rat intervertebral disc cells

瞬时受体电位 Vanilloid 4 (TRPV4) 激活促进大鼠椎间盘细胞自噬并通过 AMPK 途径增加细胞外基质合成

• 发表时间: 2023
• 作者: Kohei Kuroshima;YoshikiTakeoka;Zhongying Zhang;Takashi Yurube;Kunihiko Miyazaki;Hiroki Ohnishi;Masao Ryu;Tomoya Matsuo;Naotoshi Kumagai; Yoshiaki Hiranaka;Ryosuke Kuroda;Kenichiro Kakutani
• 通讯作者: Kenichiro Kakutani