腎癌薬剤耐性獲得におけるBCL2A1の機能解析と新規治療戦略の開発

BCL2A1在肾癌耐药中的功能分析及新治疗策略的开发

• 批准号: 22K16813
• 负责人: 八木 真由
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16813/
• 关键词: 腎癌; アポトーシス; BCL2A1

腎癌は、細胞傷害性抗癌剤や放射線治療に対して抵抗性である。現在、開発・承認されている分子標的薬、免疫チェックポイント阻害剤においても、多くの患者で初期耐性や獲得耐性がみられる。本研究では、内因性アポトーシスを調整するBCL2ファミリータンパクのうち、抗アポトーシス作用のBCL2A1が腎癌のアポトーシス回避機構に関与すると仮定し、その作用の解析と阻害効果について検討した。腎癌細胞株（786-O、A-498、769-P）を用いてBCL2ファミリータンパクの発現をウエスタンブロット法で確認すると、786-OはBCL2A1高発現株、769-P、A-498は低発現株であり、786-Oに対して、siRNA法を用いてBCL2A1をノックダウンすると、有意な細胞生存率の低下を示した。また、BCL2A1ノックダウンによるBCL2ファミリータンパクの変化を確認すると、アポトーシス促進性に働くBAK、BIM、BAD、BID、NOXAの発現が上昇する一方で、アポトーシス抑制性に働くMCL-１、BCL-2の発現が上昇していた。このことから、アポトーシス抑制性に働くタンパクのうち、MCL-1やBCL-2よりもBCL2A1の方が細胞生存に重要な役割を持っていることが示唆された。さらに、BCL2A1阻害効果を確認するため、汎BCL2阻害剤であるsabutoclax（BCL2A1、BCL2、BCLxLおよびMCL-1阻害）とAT101（BCL2、BCLxLおよびMCL-1阻害）をそれぞれの細胞株に添加すると、いずれの細胞株でもAT101よりsabutoclaxのIC50が著明に低濃度であり、BCL2A1阻害作用の重要性が確認された。また、BCL2A1高発現である786-Oではsabutoclaxの濃度依存性に細胞生存率が低下したが、769-P、A-498では、高濃度にしても一定以上の効果が得られなかった。

Renal cancer に, cell-damaging anticancer drugs や, radiotherapy に against て resistance である. Now, open 発 admitted さ れ て い る 薬, immune molecule mark チ ェ ッ ク ポ イ ン ト resistance against tonic に お い て も, multiple く の patients early で patience や gain patience が み ら れ る. This study で は, endogenous ア ポ ト ー シ ス を adjustment す る BCL2 フ ァ ミ リ ー タ ン パ ク の う ち, resisting ア ポ ト ー シ ス role の BCL2A1 が kidney の ア ポ ト ー シ ス avoid institutions に masato and す る と 仮 し, そ の role の parsing と resistance against unseen fruit に つ い て beg し 検 た. Renal cancer cell lines (786 - O, A - 498, 769 - P) を with い て BCL2 フ ァ ミ リ ー タ ン パ ク の 発 now を ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ ト method で confirm す る と, 786 - O は BCL2A1 high 発 plant, 769 - P, now A - 498 は 発 now plants で あ り, 786 - O に し seaborne て, siRNA を with い て B CL2A1をノッ ダウ ダウ すると すると the survival rate of intentional な cells is slightly low を indicating た た. ま た, BCL2A1 ノ ッ ク ダ ウ ン に よ る BCL2 フ ァ ミ リ ー タ ン パ ク の variations change を confirm す る と, ア ポ ト ー シ ス sex に 働 く BAK, BIM, BAD, BID, NOXA の 発 now rising が す る で, ア ポ ト ー シ ス inhibitory に 働 く MCL - 1, the BCL - 2 の 発 now rising が し て い た. こ の こ と か ら, ア ポ ト ー シ ス inhibitory に 働 く タ ン パ ク の う ち や, MCL - 1 the BCL - 2 よ り も BCL2A1 の party が cell survival に cut を hold important な service っ て い る こ と が in stopping さ れ た. さ ら に, BCL2A1 resistance against unseen fruit を confirm す る た め, generic BCL2 resistance against tonic で あ る sabutoclax (BCL2A1 BCL2 BCLxL お よ び resistance against (MCL) と AT101 (BCL2, BCLxL お よ び resistance against (MCL) を そ れ ぞ れ の cell lines に add す る と, い ず れ の The cell line で で AT101よ <s:1> sabutoclax <s:1> IC50が indicates the importance of に low concentration であ <e:1> and BCL2A1 damage inhibition <e:1> が confirms された. ま た, high BCL2A1 発 now で あ る 786 - O で は sabutoclax の low concentration dependence に cell survival が し た が, 769 - P, A - 498 で は, high concentration に し て も above A certain の fruit comes unseen が ら れ な か っ た.