病的新生血管の制御を目指した新規網膜器官培養法の開発

开发一种新的视网膜器官培养方法，旨在控制病理性新生血管形成

• 批准号: 22K16950
• 负责人: 高橋 静
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16950/
• 关键词: 内皮細胞; 網膜器官培養; ライブイメージング; 血管新生; 網膜; 器官培養

本研究では、マウス網膜の器官培養法を新たに開発し、発生期もしくは病的血管新生でみられる細胞動態を評価するため観察系の構築を目指す。本年度は、器官培養法の開発を試みた。予備研究で課題であった網膜の変形は、type1コラーゲンに網膜を埋め込むことで形状保持を可能とした。網膜血管の発生を再現できる網膜器官培養に適した培地ならびにサプリメントを検討した。生後4日の新生仔マウス網膜を種々の培地・サプリメントを用いて40%酸素濃度下に24時間培養した後、ホールマウント免疫染色により培養網膜の血管形態ならびに内皮数を生後5日マウス網膜のそれと比較した。神経系細胞に適したB27・N2サプリメントを添加した培地では血管伸長、血管径、血管分岐数のいずれも減少し、内皮細胞は数だけでなく配向にも凝集様の変化がみられた。一方、血管内皮細胞に適したVEGFとFGFを添加した培地では、血管伸長、血管径、分岐数は神経系の培地よりも有意に増加したが生後5日マウスと同等にはならなかった。このとき、抗a-SMA、抗NG2抗体による免疫染色においてペリサイトによる内皮細胞の被覆が障害されていたことから、さらにPDGF-BBを添加して培養したところ、生後5日マウス網膜の血管形態と同等となった。VEGF, FGF, PDGF-BBの３つのサイトカインと化合物を添加した培地を用いることで生体に類似した発生期の血管新生をex vivoで誘導することができた。

This study is aimed at the development of a new method for organ culture of retina, the evaluation of angiogenesis and the construction of an observation system. This year, the development of organ culture method was tried. To prepare for the research topic, the shape of the film is different, type1 is different, the shape of the film is different, and the shape of the film is different. Reproduction of retinal vessels in vitro culture of retinal organs After 4 days of birth, the retina was cultured for 24 hours at 40% acid concentration. After immunostaining, the retina was cultured for 5 days. The morphology of blood vessels and endothelial cells were compared. The increase of B27·N2 concentration in neurocytes resulted in the decrease of vascular elongation, vascular diameter and vascular branching, and the decrease of endothelial cell concentration and aggregation. One side, vascular endothelial cells, VEGF, VEGF Anti-SMA and anti-NG2 antibodies were added to the endothelial cells and the vascular morphology of the retina was similar. VEGF, FGF, PDGF-BB and other three kinds of compounds are added to the culture medium, which is similar to angiogenesis induced ex vivo.

项目成果

非典型的な網膜滲出斑にて発症したサイトメガロウイルス網膜炎の1例

非典型视网膜渗出物致巨细胞病毒性视网膜炎1例

• 发表时间: 2022
• 作者: Miyazawa Kosuke;Sakimoto Susumu;Kanai Masanori;Shiraki Akihiko;Takahashi Shizuka;Shiraki Nobuhiko;Maruyama Kazuichi;Sakaguchi Hirokazu;Nishida Kohji;高橋静
• 通讯作者: 高橋静

Cytomegalovirus-Induced Optic Neuritis Through Cerebrospinal Fluid Viral Transmission in an Immunocompetent Patient: A Case Report

免疫功能正常患者中巨细胞病毒通过脑脊液病毒传播引起的视神经炎：病例报告

• DOI: 10.1097/wno.0000000000001834
• 发表时间: 2023
• 期刊: Journal of Neuro-Ophthalmlogy
• 作者: Takahashi;Shizuka MD;PhD; Hashida;Noriyasu MD;PhD; Maruyama;Kazuichi MD;PhD; Omura;Rina MD; Sakurai;Rei MD; Morimoto;Takeshi MD;PhD; Nishida;Kohji MD;PhD
• 通讯作者: PhD

Embedding Technique versus Conventional Internal Limiting Membrane Peeling for Lamellar Macular Holes with Epiretinal Proliferation

包埋技术与传统内界膜剥离术治疗伴有视网膜前增殖的板层黄斑裂孔

• DOI: 10.1016/j.oret.2022.07.009
• 发表时间: 2023
• 期刊: Ophthalmology Retina
• 影响因子: 4.5
• 作者: Kanai Masanori;Sakimoto Susumu;Takahashi Shizuka;Nishida Kentaro;Maruyama Kazuichi;Sato Shigeru;Sakaguchi Hirokazu;Nishida Kohji
• 通讯作者: Nishida Kohji