増殖糖尿病網膜症における線維増殖に対する薬物治療法の構築

增殖性糖尿病视网膜病变纤维增殖药物治疗的进展

• 批准号: 22K16973
• 负责人: 小林 義行
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16973/
• 关键词: テネイシンC; 線維血管増殖; ペリサイト; 形質転換; 眼内線維増殖; 網膜色素上皮; 上皮間葉転換

網膜下に線維増殖を生じる加齢黄斑変性において、網膜色素上皮(RPE)細胞が上皮間葉転換(EMT)を経て筋線維芽細胞様に変化し病態に関与することが知られている。申請者らは過去にテネイシンC siRNAを導入することでRPE細胞のEMTを抑制できることを見出した。このことから、網膜上に線維増殖を生じる増殖糖尿病網膜症(PDR)において、テネイシンC遺伝子発現を抑制することで周皮細胞の筋線維芽細胞への形質転換（PMT)を制御し線維増殖を抑制することができるのではないかと仮説を立てた。まず、PDR患者の硝子体液で濃度上昇していることが知られているTGF-βをヒト培養周皮細胞に添加し、細胞外マトリックスであるコラーゲン1A1、コラーゲン1A2、テネイシンC、ペリオスチン、ビメンチン、ファイブロネクチン、PMTマーカーであるαSMA、NG2、転写因子であるSNAILをリアルタイムPCRで測定した。TGF-βを0, 0.3, 1, 3 ng/mLの濃度で添加したところ、コラーゲン1A1、コラーゲン1A2、ペリオスチン、ビメンチンはTGF-β濃度依存的に発現が上昇した。一方でテネイシンCとファイブロネクチンは濃度依存的な変化を認めず、NG2はTGF-β濃度依存的に発現が低下した。次に、TGF-β2依存性の周皮細胞PMTへのペリオスチンsiRNAおよびテネイシンC siRNAによる抑制効果を検討した。ヒト培養周皮細胞にTGF-β2およびペリオスチンsiRNAまたはテネイシンC siRNAをトランスフェクションしたところリアルタイムPCRでのαSMAは抑制されなかった。以上の結果からペリオスチンsiRNAおよびテネイシンC siRNAによるTGF-β2依存性の周皮細胞PMT抑制効果は認められなかった。

Retinal に line d rights under colonization を raw じ る plus 齢 macular - sex に お い て, retinal pigment epithelium (RPE) cells が epithelial mesenchymal planning in (EMT) を 経 て muscle line d bud cells others に variations change し pathological に masato and す る こ と が know ら れ て い る. Applicants ら は past に テ ネ イ シ ン C siRNA を import す る こ と で RPE cells の EMT を inhibit で き る こ と を shows し た. こ の こ と か ら, に line on retinal d raised colonization を raw じ る raised yield on diabetic retinopathy (PDR) に お い て, テ ネ イ シ ン C heritage 伝 son 発 now を inhibit す る こ と で periderm cells の muscle line d bud へ の form quality planning in (PMT) を suppression し line d raised colonization を inhibit す る こ と が で き る の で は な い か と 仮 said を て た. ま ず, PDR patients の rise of glass fluid で し て い る こ と が know ら れ て い る TGF - beta を ヒ ト に add し culture week skin cells and extracellular マ ト リ ッ ク ス で あ る コ ラ ー ゲ ン 1 a1, コ ラ ー ゲ ン 1 a2, テ ネ イ シ ン C, ペ リ オ ス チ ン, ビ メ ン チ ン, フ ァ イ ブ ロ ネ ク チ ン, PMT マ ー カ ー で あ る αSMA, NG2, 転 writing factors であるSNAILをリア タ タ ム ムPCRで determination of た た. TGF - beta を 0, 0.3, 1, 3 ng/mL の concentration で add し た と こ ろ, コ ラ ー ゲ ン 1 a1, コ ラ ー ゲ ン 1 a2, ペ リ オ ス チ ン, ビ メ ン チ ン は TGF - beta concentration dependent に 発 now rising が し た. Party で テ ネ イ シ ン C と フ ァ イ ブ ロ ネ ク チ ン は concentration dependent な variations change を recognize め ず, NG2 は TGF - beta concentration dependent に 発 now low が し た. に, TGF - beta 2 dependency の periderm cells PMT へ の ペ リ オ ス チ ン siRNA お よ び テ ネ イ シ ン C siRNA に よ る inhibition of unseen fruit を beg し 検 た. ヒ ト training week skin cells に TGF - beta 2 お よ び ペ リ オ ス チ ン siRNA ま た は テ ネ イ シ ン C siRNA を ト ラ ン ス フ ェ ク シ ョ ン し た と こ ろ リ ア ル タ イ ム PCR で の alpha SMA は inhibit さ れ な か っ た. の above results か ら ペ リ オ ス チ ン siRNA お よ び テ ネ イ シ ン C siRNA に よ る TGF - beta 2 dependency の periderm cell PMT inhibiting unseen fruit は recognize め ら れ な か っ た.