炎症性疾患制御におけるIL-1α のN末断片の機能の解明

阐明 IL-1α N 末端片段在控制炎症性疾病中的功能

• 批准号: 22K17027
• 负责人: 角田 麻里子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K17027/
• 关键词: propiece IL-1α (ppIL-1α); precursor IL-1α (pIL-1α); mature IL-1 α (mIL-1α); alarmin; calpain; 炎症; propiece IL-1α （ppIL-1α）; precursor IL- 1α（pIL-1α）; mature IL-1α（mIL-1α）; IL-1α

IL-1αは，細胞質内で前駆体precursor IL-1α（pIL-1α）として産生されたのち，calpainにより酵素的に切断され，N末端側propiece IL-1α（ppIL-1α）と，C末端側mature IL-1α（mIL-1α）に切断される。pIL-1αおよびmIL-1αは細胞外に分泌され，サイトカインとして機能しているが，ppIL-1αに関しては，ある種の遺伝子の発現に間接的に関与しているとの報告以外に，その機能は全く不明である。そこでまずは，ppIL-1αの生合成についてrecombinant pIL-1α（rpIL-1α）を用いてpIL-1αの切断を実験的に検証した。Calpainが発現していることを確認済みであるヒト口腔扁平上皮癌由来細胞（Ca9-22）およびヒト単球系細胞株（U-937）を，CaCl2およびキレート剤であるEGTAの存在下，非存在下でrpIL-1αと混合し，WBで検索した。その結果，CaCl2の存在下で，Ca9-22およびU-937のいずれの細胞においてもpIL-1αの34kDaの分子量のバンドが消失していた。一方，EGTA存在下では，34kDaのバンドは消失しなかった。このことから，pIL-1α切断は，Caイオン要求性のタンパク質分解酵素により行われている可能性が示唆された。Calpainの関与による切断であることを実証するため，calpainに対する抗体で活性の消失の有無などの検討を今後加える必要がある。興味深いことに，calpainが発現している他の細胞種についても同様にpIL-1αの切断実験を試みたが，pIL-1αの消失は僅かであり，Ca9-22およびU-937のような高度の切断効率は認められなかった。このことから，pIL-1αのcalpainによる切断効率は細胞種によって異なることが示唆された。

IL-1 α, intracellular precursor precursor IL-1 α (pIL-1 α), calpain enzyme cleavage, N-terminal propiece IL-1 α (ppIL-1 α), C-terminal mature IL-1 α (mIL-1 α). The extracellular secretion of pIL-1 α is sensitive to mIL-1 α, while that of ppIL-1 α is sensitive to that of ppIL-1 α. In addition to the reports of all kinds of drugs, all of them are unknown. Recombinant pIL-1 α (rpIL-1 α) was synthesized by the synthesis of ppIL-1 α and was cut off by using the compound pIL-1 α. In Calpain, we confirmed that the origin of oral squamous cell carcinoma (Ca9-22), the cell line of oral spheroid cell line (UMMI 937), the cell line of oral squamous cell carcinoma (EGTA), the mixture of rpIL-1 α and the presence of WB. The results showed that CaCl2 was present, and Ca9-22 was responsible for the loss of molecular weight of pIL-1 α-34kDa. On the one hand, there is an EGTA, and the 34kDa is missing. PIL-1 α was cut off, Ca was asked for sex, the enzyme was broken down, and the possibility was indicated. The activity of Calpain antibody disappeared, the activity of antibody disappeared, and the activity of antibody disappeared. The smell is so bad that calpain can tell you that other species have been cut off in the same way as pIL-1 α, pIL-1 α has disappeared, and Ca9-22 has been cut off at the height of 937. The rate of pIL-1 α-calpain cut-off rate is much higher than that of other cell types, indicating that it is instigated.

项目成果

pIL-1α processing における Calpain の活性と機能の追求

探究钙蛋白酶在 pIL-1α 加工中的活性和功能

• 发表时间: 2022
• 作者: Yasunori Yamashita;Atsutoshi Yoshimura;角田 麻里子
• 通讯作者: 角田 麻里子