iPS由来幹細胞エクソソームによる歯周組織再生効果の基礎的研究

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申請者が以前に作製していたiPSMSLCを凍結保存状態から解凍し、培養を行った。その際に、正常な増殖能を示すかをWST-8を用いて評価した。その結果、iPSMSLCの増殖能に異常は見られなかった。そのため、培養を行い、エクソソーム抽出する際に必要になると思われる細胞数を確保し、凍結保存を行った。また、長期保存していたため、細胞の表面抗原に異常が無いかをフローサイトメトリーにて確認した。結果、iPSMSLCに凍結保存前と同様に幹細胞マーカーの発現を認めた。造血幹細胞マーカーは陰性であった。また、iPSMSLCが正常に骨分化を行えるかを評価すべく、骨分化培地での培養を行った。骨分化が完了したのが、年度の変わり目であっため、2023年度にPCR、アリザリンレッド染色等を行い、骨芽細胞への分化を確認する予定である。これと並行して、以前に使用したiPS細胞（409B2）とは異なるiPS細胞（1231A3）からiPSMSLCを樹立すべく、iPS細胞の培養を行った。2023年度に同iPS細胞（1231A3）よりiPSMSLCへの分化を試みる予定である。他の細胞を用いてエクソソーム抽出を行い、抽出手技に問題がないことも確認している。そのため、iPSMSLCでエクソソームを抽出する際も支障なく実施可能である。2023年度中にiPSMSLCよりエクソソームを抽出し、その特性（粒径、表面抗原等）を評価する予定としている。