歯周病原細菌Treponema denticola の環境ストレス応答機構の解明

阐明牙周病原菌齿垢密螺旋体的环境应激反应机制

• 批准号: 22K17066
• 负责人: 北村 友里恵
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Tokyo Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K17066/
• 关键词: 歯周病原細菌; Treponema denticola; 遺伝子発現調節; 酸素ストレス

Toreponema denticola の遺伝子であるTDE_0127が，T. denticola においてどのような機能を果たしているかについて解明するため，TDE_0127遺伝子欠損株を作出した。TDE_0127が発現調節すると思われる遺伝子群を明らかにするため，欠損株のDNA マイクロアレイ解析を行った。その結果，野生株と比較して，本菌の表層タンパク質発現に関与する可能性のある遺伝子を含む，さまざまな遺伝子の発現変動を認めた。TDE_0127はDNA binding protein をコードするとされ，転写調節因子として表層タンパク質発現に関与する遺伝子群の調節に関わることが示唆された。また，酸素ストレス応答への関与について検討するため，酸素ストレス耐性能について，ATPアッセイを用いて評価した。その結果，野生株と比較し，欠損株は酸素曝露下の生菌数の有意な減少を認めた。TDE_0127がコードするDNA binding protein は，酸素ストレスに対する応答に関わっていることが示唆された。RNA-seq の結果，本菌の表層タンパク質であるLrrタンパク質をコードする遺伝子の発現量が，野生株と比較し有意に増加した。Lrrタンパク質の抗体を用いて，ウエスタンブロット解析を行った。画像解析ソフトを用いてLrrタンパク質のバンドの濃度をもとに，タンパク質発現量を評価した。欠損株におけるLrrタンパク質の発現量は，野生株と比較して有意に増加した。これらの結果から，DNA binding protein をコードするTDE_0127は本菌の表層タンパク質であるLrrタンパク質の発現調節に関与することが示唆された。

Toreponema denticola no子TDE_0127, T. Denticola is a functional entity that can be used to determine the exact location of a plant. TDE_0127-DNA analysis of defective plants As a result, compared with wild strains, the possibility of the development of the surface layer of this strain is related to the existence of the gene, and the development of the gene is recognized. TDE_0127 DNA binding protein expression is related to the expression of regulatory factors in the surface layer and the expression of regulatory factors in the subgroup. For example, acid resistance can be evaluated in the presence of ATP. As a result, the number of bacteria in the damaged plants was significantly reduced under acid exposure compared with wild plants. TDE_0127 is a DNA binding protein that binds DNA to a protein. As a result of RNA-seq, the amount of DNA produced in the surface layer of the strain was significantly higher than that in the wild strain. Lrr is the most important part of the antibody analysis. Image analysis software is used to evaluate the quality of the image. The yield of defective plants increased intentionally compared with wild plants. As a result, TDE_0127 showed that the DNA binding protein was related to the regulation of the production of the surface layer protein of the strain.

项目成果

Treponema denticola の病原性発現における新規転写調節因子の役割の解明

阐明新型转录调节因子在齿垢密螺旋体致病性中的作用

• 发表时间: 2022
• 作者: Rio Hisanaga;Yurie Kitamura;Keiko Yamashita;Kazuyuki Ishihara;and Atsushi Saito;久永理央，北村友里恵，山下慶子，齋藤 淳，石原和幸
• 通讯作者: 久永理央，北村友里恵，山下慶子，齋藤 淳，石原和幸

Characterization of the genes associated with stress response in Treponema denticola

齿垢密螺旋体应激反应相关基因的表征

• 发表时间: 2022
• 作者: Keiko Yamashita;Yurie Kitamura;Rio Hisanaga;Yuichiro Kikuchi;Eitoyo Kokubu;Takashi Namba;Kazuyuki Ishihara;and Atsushi Saito
• 通讯作者: and Atsushi Saito

Investigation of a transcriptional-regulator coding gene potentially involved in T.denticola dentilisin expression

可能参与 T.denticola dentilisin 表达的转录调节因子编码基因的研究

• 发表时间: 2022
• 作者: Rio Hisanaga;Yurie Kitamura;Keiko Yamashita;Kazuyuki Ishihara;and Atsushi Saito
• 通讯作者: and Atsushi Saito