Application of RARg antagonist to periodontal regeneration therapy.

RARg拮抗剂在牙周再生治疗中的应用

• 批准号: 22K17099
• 负责人: 長尾 麻由
• 金额: $ 2.16万
• 依托单位: Aichi Gakuin University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K17099/
• 关键词: RAR; 骨再生; 石灰化; 歯周再生療法; 骨芽細胞

本研究は、骨代謝に重要な役割を果たすRARγ（レチノイン酸受容体γ）に着目し、RARγアンタゴニストが骨再生に及ぼす影響を解明する事を目的としている。今年度は、RARγアンタゴニストがマウス頭蓋冠由来株化骨芽細胞であるMC3T3-E1細胞の石灰化に及ぼす影響を検討した。MC3T3-E1細胞を24wellプレートに5×10^4 cells/well播種し、 生着後にRARγ選択的アンタゴニストであるMM11253(０、1、2.5、5、10uM)を添加し、石灰化培地にて14日間培養した。培養後、細胞を4%PFAで固定しALP染色を行なった。また、９６wellプレートにMC3T3-E1細胞0.5×10^4 cells/well播種した後、ELISAにて3、5、7、10日後にALP活性を測定した。ALP染色の結果、MM11253刺激群はControlと比較してより赤く染色され、濃度依存的にALP活性の亢進が認められた。また、ALP活性をELISAにて検討したところ、濃度依存的にALP活性の上昇傾向を認めた。このことから、RARγアンタゴニストは骨芽細胞のALP活性を促進する可能性が示唆された。次に、MC3T3-E1細胞をMM11253(０、1、2.5uM)で７日間刺激後、遺伝子発現の変化をPCRにて検討したところ、ALPは濃度依存的に増加した。これらの結果から、RARγアンタゴニストはALP活性を促進することが示唆された。一方、RunX2の遺伝子発現はRARγアンタゴニストにより変化しなかった。骨芽細胞の分化に関するOCNなどの遺伝子発現がRARγアンタゴニストにより変化するのか、さらなる検討が必要である。

In this study, bone substitute is important to cut the results of RAR γ (acid receptor gamma), RAR γ, bone regeneration, bone regeneration and bone regeneration. This year, RAR γ-ray plant bone bud cell, bone bud cell, MC3T3-E1 cell, calcareous cell and calcareous cell are the origin of the crown. MC3T3-E1 cells used 5 × 10 ^ 4 cells/well to sow seeds, RAR γ-selected samples were added to MM11253 (0,1,2.5,5, 10uM), and calcareous soil was incubated within 14 days. After culture, the cells were fixed by 4%PFA and stained with ALP. The activity of MC3T3-E1 was determined after sowing 0.5 × 10 ^ 4 cells/well and 3, 5, 7, 10 days after ELISA incubation. The results of ALP staining, the results of MM11253-stimulated Control were compared with those of red staining, and the degree-dependent ALP activity was increased. The activity of ALP, the activity of ELISA, the activity of ALP, the activity of DNA, the activity of DNA and the activity of DNA. The possibility of promoting the activity of ALP in bone germ cells was indicated by the possibility of promoting bone bud activity. After 7-day stimulation of MM11253 (0,1, 2.5uM) in secondary and MC3T3-E1 cells, the response of PCR cells was increased, and that of ALP concentration dependent was observed. The results showed that the activity of RAR γ-ray increased the activity of ALP and showed that it was instigated. On the one hand, the RunX2 has a negative effect on the RAR γ-ray radiation level. The differentiation of bone buds from OCN cells showed that RAR γ-rays were detected in the cells of bone buds.