骨膜欠損創の再生における骨髄由来細胞の役割に関するメカニズムの解明とその応用

阐明骨髓源细胞在骨膜缺损再生中的作用机制及其应用

• 批准号: 22K17180
• 负责人: 越沼 伸也
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Shiga University of Medical Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K17180/
• 关键词: 再生医療; 創傷治癒; 骨髄由来細胞; スキャフォールド

野生型およびGFPラットの骨髄移植を受けたラット(BMTラット)に頭頂部に骨膜欠損創を作製し、GSを留置しない群(GS-群)とする群(GS+群)に分けた。ラットはそれぞれ2、4、6週後に安楽死させ、組織学的解析、免疫組織化学解析を施行した。血管新生の解析にはα-SMA、NG2、CD31を用い、骨表面における血管新生の解析にはCD105、CD106を用いた。再生された骨膜、神経線維、毛乳頭の評価にはそれぞれPOSTN、PGP9.5、LEF-1を用いた。また量的解析として各群の創部における血管数およびGFP+細胞の割合を測定した。野生型ラットのGS+群では、毛包を伴った皮膚の層構造が再生された。免疫組織学的染色ではGS+群ではPOSTN+の骨膜やCD31+/α-SMA+の血管が観察されたことから、GS+群では骨膜を含めた異種組織再生が起こっていることが明らかとなった。次にBMTラットを用いて、骨膜欠損創の創傷治癒におけるBMDCの挙動を解析した。免疫組織学的染色において、GS+群では術後2週にGFP+の血管が観察された。一方、GS-群では術後4週までは血管やGFP+細胞は見られず、術後6週で観察されたGFP+細胞は血管を形成していなかった。骨面近傍においてGS-群では血管が観察されなかったのに対して、GS+群では術後4週においてGFP+陽性の血管が観察され、術後4週以降で骨膜(GFP-)が観察された。また、GS-群では皮膚付属器官は観察されなかったが、GS+群では術後2週から観察された。骨膜のGFP+細胞の割合は、GS+群では術後4週でピークに達し、術後6週で減少した。これは創傷を加えていないラット（control群）と比較すると有意に大きかった。この傾向は、再生された骨膜の厚さについても同様であった。また、真皮や皮下組織の血管数は、GFP+細胞の割合の結果と相関がみられた。

The wild type bone grafts were grafted with BMT bone grafts, and the periosteum was subdivided into two groups: GS- group (GS- group) and GS+ group (GS+ group). After 2, 4 and 6 weeks of treatment, euthanasia, histological analysis and immunohistochemical analysis were performed. Angiogenesis analysis: α-SMA, NG2, CD31, bone surface angiogenesis, CD105, CD106. POSTN, PGP9.5 and LEF-1 were used to regenerate the periosteum, milk and milk. The analysis of the quantity, the number of blood vessels, the number of blood vessels, the number of GFP+ cells, the determination of blood vessels, the number of blood vessels and the number of blood vessels. Wild-type mackerel, GS+ group, pouch, skin, etc. Immunohistochemical staining showed that the periosteum of GS+ group was stained with CD31+/ α-SMA+, and the periosteum of GS+ group was detected by immunocytochemistry. In the treatment of secondary BMT syndrome and periosteal insufficiency, the diagnosis and treatment of periosteal insufficiency were analyzed by BMDC. Immunohistochemical staining and GS+ group staining showed that the blood vessels were not detected 2 days after GFP+. On the other hand, the blood vessels of the GS- group were divided into two groups: the blood vessels, the GFP+ cells, the blood vessels, the blood vessels. Near the bone surface, the blood vessels of the GS- group were observed, the blood vessels of the GS+ group were detected 4 weeks later, the sexual blood vessels of the GFP+ group were detected 4 weeks later, and the periosteum (GFP-) was detected 4 weeks later. The organs of the GS- group and the GS+ group were examined in the second half of the year. The periosteal GFP+ cells were dissected, the GS+ group was divided into four groups, and the second six months were less. The control group is much larger than the group with the intention to increase the number of people. The thickness of the periosteum, the thickness of the periosteum and the thickness of the periosteum. The number of blood vessels in the subcutaneous tissue of dermis and dermis, and the results of GFP+ cell splicing were compared.