骨膜欠損創の再生における骨髄由来細胞の役割に関するメカニズムの解明とその応用

阐明骨髓源细胞在骨膜缺损再生中的作用机制及其应用

基本信息

  • 批准号:
    22K17180
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.58万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
  • 财政年份:
    2022
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2022-04-01 至 2025-03-31
  • 项目状态:
    未结题

项目摘要

野生型およびGFPラットの骨髄移植を受けたラット(BMTラット)に頭頂部に骨膜欠損創を作製し、GSを留置しない群(GS-群)とする群(GS+群)に分けた。ラットはそれぞれ2、4、6週後に安楽死させ、組織学的解析、免疫組織化学解析を施行した。血管新生の解析にはα-SMA、NG2、CD31を用い、骨表面における血管新生の解析にはCD105、CD106を用いた。再生された骨膜、神経線維、毛乳頭の評価にはそれぞれPOSTN、PGP9.5、LEF-1を用いた。また量的解析として各群の創部における血管数およびGFP+細胞の割合を測定した。野生型ラットのGS+群では、毛包を伴った皮膚の層構造が再生された。免疫組織学的染色ではGS+群ではPOSTN+の骨膜やCD31+/α-SMA+の血管が観察されたことから、GS+群では骨膜を含めた異種組織再生が起こっていることが明らかとなった。次にBMTラットを用いて、骨膜欠損創の創傷治癒におけるBMDCの挙動を解析した。免疫組織学的染色において、GS+群では術後2週にGFP+の血管が観察された。一方、GS-群では術後4週までは血管やGFP+細胞は見られず、術後6週で観察されたGFP+細胞は血管を形成していなかった。骨面近傍においてGS-群では血管が観察されなかったのに対して、GS+群では術後4週においてGFP+陽性の血管が観察され、術後4週以降で骨膜(GFP-)が観察された。また、GS-群では皮膚付属器官は観察されなかったが、GS+群では術後2週から観察された。骨膜のGFP+細胞の割合は、GS+群では術後4週でピークに達し、術後6週で減少した。これは創傷を加えていないラット(control群)と比較すると有意に大きかった。この傾向は、再生された骨膜の厚さについても同様であった。また、真皮や皮下組織の血管数は、GFP+細胞の割合の結果と相関がみられた。
Wild type お よ び GFP ラ ッ ト の bone marrow transplant を け た ラ ッ ト (BMT ラ ッ ト) に on に し the periosteum owe loss "を cropping, GS を lien し な い group (GS) と す る group (GS) + group に points け た. Youdaoplaceholder0 ラット それぞれ それぞれ2, 4, and 6 weeks later に anraku death させ, histological analysis, immunohistochemical analysis を perform た た. Angiogenesis <s:1> analysis に に α-SMA, NG2, CD31を is used for を, bone surface における angiogenesis <s:1> analysis に に CD105, CD106を is used for た た. Regeneration of された periosium, shinken thread, papillary hair, 価に それぞれ それぞれPOSTN, PGP9.5, LEF-1を use された た. Analysis of また quantities と <s:1> て て て the number of blood vessels in each group of <s:1> wounds および the number of blood vessels および the combination of GFP+ cells <s:1> を determination of た た. Wild-type ラット <s:1> GS+ group で, hair follicles を with った skin <s:1> layer structure が regeneration された. Immune histological staining で は GS + group で は POSTN + の periosteum や CD31 + / alpha SMA + の vascular が 観 examine さ れ た こ と か ら, GS + group で は periosteum を containing め た heterogeneous tissue regeneration が up こ っ て い る こ と が Ming ら か と な っ た. The にBMTラットを is used for the healing of <s:1> て and the injury of periosium deficiency and trauma におけるBMDC 挙 挙 movement を analysis た. Immunohistological staining にお て て, GS+ group で, にGFP+ blood vessel が観 examination された 2 weeks after the operation. One party, the GS - group of で は postoperative 4 weeks ま で は vascular や GFP + cells は see ら れ ず, six weeks after で 観 examine さ れ た GFP + cells は vascular を form し て い な か っ た. Bone surface near alongside に お い て GS - group of で は vascular が 観 examine さ れ な か っ た の に し seaborne て, GS + group で は postoperative 4 weeks に お い て GFP + positive の vascular が 観 examine さ れ, 4 weeks after operation in で periosteum (GFP) が 観 examine さ れ た. Youdaoplaceholder0, GS- group で された, skin accessory organs 観 観 examination されな ったが ったが, GS+ group で ら観 two weeks after the operation で ら観 examination された. The <s:1> GFP+ cells of the periosium were <s:1> combined and the GS+ group was で で. Four weeks after the operation, the でピ and で に に reached でピ, and six weeks after the operation, the で decreased and the <s:1> た decreased. こ れ は trauma を plus え て い な い ラ ッ ト と (control group) compare す る と intentionally に big き か っ た. The <s:1> <s:1> tends to and regenerate the された periosium, which is <s:1> thick, さに,, て and であった. The また, the number of blood vessels in the subcutaneous tissue of the dermis や, and the results of <s:1> cutting and <s:1> of GFP+ cells are と related to がみられた.

项目成果

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