口腔扁平上皮癌患者の不良予後に関与するMaspinの分子機構の解明

阐明Maspin参与口腔鳞癌患者不良预后的分子机制

• 批准号: 22K17204
• 负责人: 川崎 誠
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K17204/
• 关键词: maspin; subcellular localization; OSCC; prognosis; proliferation ability

進行した口腔扁平上皮癌(OSCC)の予後は不良であり、治療法も限られている。Maspin(mammary serine protease inhibitor)は癌抑制遺伝子として機能するとされているが、ヒト乳癌や肺癌などでは細胞質のみに発現するMaspin (cytMaspin)は独立した予後不良因子であることが報告されている。申請者らはOSCCにおいても、cytMaspinが独立した予後不良因子であることを報告したが、その詳細な分子機構は不明である。本研究では、1)ヒトOSCC細胞株におけるMaspinの細胞内局在に依存した機能解析2) Maspinの細胞内局在制御機構の解析を行い、OSCCの悪性度に関わるMaspinの役割を明らかにすることを目的としている。本研究の成果は、OSCC患者の予後予測や新たな分子標的治療薬を開発する上での基礎的データになることが期待できる。本研究の目的は、OSCCにおけるMaspinの細胞局在依存的な役割を明らかにし、cytMaspinの核移行を阻害する原因タンパクを同定することによって、OSCCに対する新規治療法や予後予測マーカー開発の基礎データを得ることである。まずは口腔扁平上皮癌細胞株におけるcytMaspinとpanMaspinの機能解析を行った。OSCC細胞株（KON, OSC20, OSC19, HO-1-N-1, HO-1-u-1等）について、real time PCR法やWestern blot法でMaspinの発現を確認し、多くの細胞株でMaspinの発現が確認できた。また発現したタンパク質について細胞質と核に分画し、細胞内局在を確認したところ多くの細胞株で細胞質優位でHo-1-u-1のみが各優位であった。またモデルを用いてsiRNAでMaspinの発現をノックダウンさせ、浸潤能及び増殖能の変化を検討したが、有意な結果が得られなかった。

Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is a serious cancer. Maspin (cytMaspin) is an independent and potentially undesirable factor in the development of cytoplasmic cancer suppressor genes such as breast cancer and lung cancer. The applicant shall report to the OSCC, cytMaspin, and the detailed molecular mechanism shall be unknown. This study includes: (1) Analysis of Maspin's intracellular regulatory mechanism in OSCC cell lines;(2) Analysis of Maspin's intracellular regulatory mechanism;(3) Analysis of Maspin's intracellular regulatory mechanism;(4) Analysis of Maspin's regulatory mechanism;(5) Analysis of Maspin's intracellular regulatory mechanism;(6) Analysis of Maspin's regulatory mechanism;(7) Analysis of Maspin's regulatory mechanism;(8) Analysis of Maspin's intracellular regulatory mechanism;(9) Analysis of Maspin's regulatory mechanism; and (9) Analysis of Maspin's regulatory mechanism. The results of this study provide a basis for future prediction and development of novel molecular target therapies for OSCC patients. The purpose of this study is to clarify the reasons for the dependence of Maspin on OSCC, to identify the reasons for the inhibition of nuclear migration by cytMaspin, and to develop new treatment methods for OSCC and to obtain the basis for future prediction. The functional analysis of cytMaspin and panMaspin in oral squamous cell carcinoma cell line Maspin expression was confirmed in OSCC cell lines (KON, OSC20, OSC19, HO-1-N-1, HO-1-u-1, etc.) by real time PCR and Western blot. The cytoplasmic and nuclear structure of many cell lines was confirmed. The cytoplasmic and nuclear structure of many cell lines was determined by Ho-1-u-1. The expression of Maspin in siRNA was studied by means of the analysis of the expression of Maspin mRNA and protein, and the expression of Maspin mRNA and protein was studied by means of the analysis of Maspin mRNA and protein.