樹立標準細胞を用いた新規薬剤アレルギー試験法の確立

使用已建立的标准细胞建立新的药物过敏测试方法

• 批准号: 22K18233
• 负责人: 安高 勇気
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Fukuoka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K18233/
• 关键词: アレルギー; アレルギー試験

各種疾患の治療に際しては、特定の薬物に対する患者のアレルギー発現の有無が薬剤の選択や治療方針を左右することも多く、このような、アレルギーの予見を治療現場などで判定することができる、薬剤アレルギー判定試験システムが理想である。しかしながら、現在行われているアレルギー試験は、精度においても、所要時間においても十分なレベルとは言い難く、投与薬剤によるアレルギー症状発現後に対症療法と薬剤変更で対処しているに過ぎない。このことからも、充分な科学的根拠に基づく、安定的かつ絶対的な薬剤アレルギー判定試験システムの研究開発が待たれている。本研究では、申請者らが既に基盤構築を終えているアレルギー試験システムにおいて、安定的で汎用性の高い薬剤アレルギー試験法を確立することを目的に研究を遂行し、標準細胞株の走化性を指標とした高感度・高精度かつ短時間で判定可能な試験システムの基盤を構築する。初年度はアレルギー判定に使用可能な新たな細胞の樹立を中心に進めた。樹立細胞株を作製するために、遊走能を獲得したHL-60細胞にLTB4R遺伝子をレンチウイルスベクターによって導入した。次に、作製した細胞株におけるLTB4Rの発現をフローサイトメトリーにて確認したところ、遺伝子導入前の細胞と比較し、差はあるものの、顕著な差は認められなかった。この原因の一つとして、作製した細胞株のクローニングを行っていないことが考えられた。また、フローサイトメトリーで用いた特異的な抗体の細胞表面上での結合に問題がある可能性も考えられた。よって、当初の計画では、初年度中にLTB4Rを発現させた細胞株に一般的に細胞遊走に関与すると考えられるCXCR1やCXCR2などの遺伝子導入まで実施する予定であったが、遺伝子導入には高額な費用を要するため、引き続き慎重に検討することとし、新たな遺伝子導入は次年度に持ち越す方針とした。

The treatment of various diseases, the presence of specific drugs for patients, the selection of treatment policies, the number of drugs, the presence of drugs, the determination of treatment sites, and the selection of drugs are ideal. For example, if the patient has been diagnosed as a disease, the patient will be diagnosed as a disease, and the patient will be diagnosed as a disease. The research and development of this system are pending due to the scientific basis and stability of the system. This study aims to establish a stable and versatile assay for the establishment of a substrate for the construction of a standard cell line with high sensitivity, high accuracy and short time to determine the possibility of establishing a substrate. In the early years, it was determined that the new cells could be used to establish the center. Cell lines were established and cultured to obtain LTB4R gene and introduce it into HL-60 cells. The expression of LTB4R in the cell line was confirmed by comparison with that in the cell line before introduction. The reason for this is that the cell line is not easy to control. The possibility of binding specific antibodies to the cell surface is examined. In the first year of the project, LTB4R was discovered in cell lines, and the introduction of CXCR1 and CXCR2 genes was planned to be carried out at a high cost. The introduction of new genes was carefully discussed.