魚類体表粘液糖タンパク質の構造と機能

鱼体粘液糖蛋白的结构和功能

• 批准号: 09760194
• 负责人: 濱 洋一郎
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Saga University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09760194/
• 关键词: 糖タンパク質; 粘質物; 糖鎖; 魚類; ヒドラジン分解; ムチン; o-配糖体; KDN

1. ヒドラジン分解至適条件の検討-前年度は,ヒドラジン分解試料にドジョウ体表粘膜糖タンパク質(LGP)を用い,糖鎖遊離の最適条件を検討した.LGP中のシアル酸は,KDNという特殊なシアル酸類似体である.そこで,最も一般的なシアル酸であるNeuAcを構成成分とする半顎下腺ムチン(OSM),ウナギ体表粘液糖タンパク質(EDG)に本法を応用し,O-結合型糖タンパク質に普遍的なヒドラジン分解条件を検討した.OSM,EGPを様々な温度でヒドラジン分解し,遊離した糖鎖をピリジアルアミノ化後HPLCで分析し,遊離糖鎖量を求めることにより,至適条件を得た.本条件はLGPにも適用可能であった.2. アルカリ分解法との比較-前述の3種の糖タンパク質を得られた至適条件下でヒドラジン分解し,ゲルろ過(Sephadex G-25)で分画した.O-結合型糖鎖遊離法の標準である還元剤存在下でのアルカリ分解によっても糖鎖を遊離させ,同様にゲルろ過で分画し比較した.OSM,EGPから遊離した糖鎖画分中には,その遊離法に関わらず,主要糖鎖NeuAcα2→6GalNAcから成る2糖が主成分として検出された.これに加えヒドラジン分解物中には,アルカリ分解物中にはほとんど検出されないより高分子の糖鎖が存在した.さらに,LGPの分解物においては,主要糖鎖KDNα2→6GalNAc,KDNα2→3(KDNα2→6)GalNAcから成る二つのピークが溶出したが,これらの遊離量は遊離法により異なっていた.ヒドラジン分解では3糖以上の糖鎖が相対適に多量検出された.

1. A study on the optimum conditions for the decomposition of glucose in human body surface mucosa (LGP) was conducted in the past year. The most common constituent of NeuAc is submandibular gland (OSM), which contains body surface mucus carbohydrate (EDG). This method is used to investigate the general conditions for the decomposition of O-bound carbohydrate.OSM,EGP, temperature, decomposition, free carbohydrate, and HPLC analysis after degradation. The amount of added carbohydrate is determined. The most suitable conditions are obtained. This condition is applicable to LGP. 2. Comparison of the three kinds of carbohydrate decomposition methods-the above three kinds of carbohydrate decomposition methods are obtained under suitable conditions (Sephadex G-25) The standard of O-conjugated glycan dissociation method is to dissociate glycan in the presence of reducing agent.OSM,EGP dissociate glycan in the presence of reducing agent.OSM,EGP dissociate glycan in the presence of reducing agent. In addition, in the decomposition products, there is no sugar chain in the polymer. In addition, the decomposition products of LGP are mainly sugar chains KDNα2→6GalNAc,KDNα2→3(KDNα2→6)GalNAc. The sugar chain of more than 3 sugars is relatively large in quantity.