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赤外差分光法によるヘムタンパク質およびそのモデル系の触媒機構の解析

红外微分光谱分析血红素蛋白及其模型系统的催化机制

基本信息

批准号：
10750645
负责人：
前田寧
金额：
$ 1.54万
依托单位：
University of Fukui
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究ではタンパク質の熱変性やフォールディングのモデル系として注目されているポリ(N-イソプロピルアクリルアミド)(PIPA)のコイル-グロビュール転移のメカニズムを明らかにするために、主に赤外分光法を用いて解析を行った。PIPAのIRスペクトルの温度依存性を測定すると、LCSTである34℃付近で急激に水和状態に変化が起こった。転移に伴いC-H伸縮振動とアミドIIバンドは低波数シフトし、アミドIバンドは高波数シフトした。また、アミドIバンドは、LCST以下では水と水素結合したC=Oに帰属される成分(1625cm^<-1>)のみからなるが、LCST以上では非水和のC=Oに帰属される成分(1650cm^<-1>が生じた。39℃以上では脱水和されているC=Oの分率はほぼ一定の約13%であった。ポリ(n-プロピルアクリルアミド)(PnPA)、ポリ(ジエチルアクリルアミド)(PDEAA)、ポリ(アクリロイルモルホリン)(PACMO)のアミドIバンドをカーブフィティング法で解析したところ、N-一置換体であるPnPAではPIPAと同様にLCST以下では水和型成分のみであったのが、LCST以上では高波数側に非水和の成分が生成した。一方、N-二置換体であるPDEAとPACMOではLCST以下でも非水和型を含む2成分であり、LCST以上では低波数側に第3成分が生成した。また、IPAとイオン性コモノマーであるビニルイミダゾール(VIM)やアクリル酸(AA)との共重合体では、コモノマーのイオン化度に依存してLCSTが変化した。さらに、VIMとIPAの共重合組成とpHを変えて転移エンタルピー(ΔH)とLCSTの関係を解析したところ、塩濃度の等しい場合には同一曲線上にのり、塩濃度の増加に従って低温、低ΔH側にシフトした。塩とコモノマー組成とではLCSTを変化させる機構が異なることが示唆された。

In this study, we analyzed the thermal properties of different kinds of materials by N-solution (PIPA) and infrared spectroscopy. The temperature dependence of PIPA IR spectrum was measured at 34℃, and the temperature dependence of LCST was measured at 34℃. C-H stretch vibration is accompanied by displacement at low waviness and displacement at high waviness. Below the LCST, water and C=O are bound to each other, and above the LCST, water and C =O <-1>are bound to each other, and above the LCST, water and C=O are bound to each other<-1>. Above 39℃, the percentage of dehydration and C=O is about 13%. The analysis of N-substituted PnPA, PDEAA, PACMO and PIPA is similar to that of PIPA. Below the LCST, there are aqueous and non-aqueous components, and above the LCST, there are non-aqueous and non-aqueous components. One side, N-two substitution body The complex of IPA and AA has been transformed into LCST. The relationship between VIM and IPA is analyzed when the concentration of VIM and IPA increases on the same curve. The organization is different.