時間分解赤外差分光法によるペルオキシダーゼ活性中間体生成のダイナミクスの解析

使用时间分辨红外差分光谱分析过氧化物酶活性中间体生产的动态

基本信息

批准号：
12750795
负责人：
前田寧
金额：
$ 1.41万
依托单位：
University of Fukui
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

ワサビペルオキシダーゼ(HRP)の軸配位子であるヒスチジンと同様なヘム配位能を持つビニルイミダゾール(VIm)、ビニルピリジン(VPy)とポリエチレングリコール(PEG)のブロック共重合体を合成し(PEG-b-PVIm, PEG-b-PVPy)、ヘムと複合体を形成させることによってペルオキシダーゼモデル触媒として、その活性と構造を解析した。VImおよび4VPyの共重合体はヘムと複合体を形成して、遊離のヘムと比べて活性が上昇するのに対して、2VPyの共重合体は立体障害のため複合体を形成せず、活性の変化も見られなかった。さらに、中心に亜鉛またはスズを有するプロトポルフィリン金属錯体と、上記のブロック共重合体の複合体の光触媒活性を解析した。これらの複合体は犠牲試薬である[Co(NH_3)_5Cl]^<2+>の存在下で可視光を照射するとグアヤコールやアミノアンチピリンを酸化することが分かった。また、タンパク質の熱変性のモデル系としてポリ(N-置換アクリルアミド)およびポリ(N-置換メタクリルアミド)のLCST型の相転移を赤外分光法を用いて解析した。置換基の構造を変化させて転移挙動とアミド基の水素結合を解析することにより、N-一置換体では相転移温度以上のグロビュールの状態でポリマーのアミド基間で水素結合が形成され、それがヒステリシス(昇温時と降温時の転移温度の差)や相転移の協同性(転移温度範囲の狭さ)といった巨視的な転移挙動に影響していることを明らかにした。

乙烯基咪唑（VIM），乙烯基吡啶（VPY）和聚乙烯乙二醇（PEG）的块共聚物，具有与组氨酸相同的血红素配位能力的聚乙烯乙二醇（PEG），芥末过氧化物酶（HRP）的轴向配体（hrp），乙烯基吡啶（vpy）和乙烯基糖（PEG）是合成基因（PEG）（PEG）（PEG） PEG-B-PVPY），将混合物的活性和结构分析为过氧化物酶模型催化剂。与自由血红素相比，与血红素复合的VIM和4VPY共聚物增加了活性，而2VPY共聚物由于空间的阻碍而没有形成复合物，并且没有观察到活性的变化。此外，分析了上述锌或锡的原形金属络合物的光催化活性和上述块共聚物复合物的光催化活性。在存在牺牲试剂[CO（NH_3）_5Cl]^<2+>的情况下，发现这些复合物被发现可氧化瓜亚科和氨基酰胺。此外，将LCST类型中聚（N-取代的丙烯酰胺）和聚（N-取代的甲基丙烯酰胺）的相变为使用红外光谱的模型系统，用于蛋白质的热变性。通过改变取代基的结构并分析酰胺群的过渡行为和氢键，据表明，在n-单骨成立的形式中，在聚合物的酰胺基团之间形成了氢键，在相位的聚合物的酰胺基团之间，相位过渡温度和诸如较高的温度在临时温度之间的相差（等级）的差异（趋势）的差异（降低了群体的差异）（相变（缩小过渡温度范围）。