ニホンナシ果実の貯蔵性に関する遺伝子診断法の確立

日本梨果实贮藏稳定性遗传诊断方法的建立

基本信息

批准号：
10760019
负责人：
板井章浩
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Tottori University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10760019/
关键词：
ニホンナシエチレン貯蔵性遺伝子診断法

项目摘要

ニホンナシをはじめとする果樹の育種の問題として、1.実生が結実するまで長年月を要する、2.個体が大きいため広大な圃場を必要とする等1,2年生作物に比べ不利な点が多い。特に果実の重要遺伝形質について評価するためには結実を待たねばならない。このため果樹育種の効率化のためには、実用形質に関連したDNA等の分子マーカーの利用が望まれる。「貯蔵性」という重要な育種目標のひとつについて、「貯蔵性」に密接に関連したエチレンの生合成関連酵素のDNAマーカーを用いて、貯蔵性に関する遺伝子診断法を確立することを目的として実験を行った。これまでに申請者らが単離した3タイプのACC合成酵素の内、2つのタイプの遺伝子をプローブとして用いたサザンハイブリダイゼーションのそれぞれの結果を組み合わせる遺伝子診断法により、ニホンナシ37品種の果実のエチレン生成量を3つのグループに分類できることを明らかにした。この診断法を鳥取大学で育成中の約200系統におよぶ実生集団(おさ二十世紀自殖系統、おさ二十世紀X新水、幸水、豊水、愛宕、慈梨等)に対する適応性を検定し、貯蔵性の遺伝子診断法を確立した。さらに確立したサザンハイブリダイゼーションを用いた遺伝子診断法では大量(10μg)のDNAおよび特別な施設を必要とするラジオアイソトープ等を使用するため、実際の育種現場で利用するには改良が必要であった。そこでより少量のサンプル(100ng)ですみかつ短時間で判定可能なPCRを利用した応用方法を開発した。

繁殖果树（包括日本梨）的问题包括1。幼苗要果实需要多年，而2。特别是，我们必须等待水果果实，以评估果实的重要遗传特征。因此，为了提高果树育种的效率，希望使用分子标记物，例如与实际性状有关的DNA。进行“储存性”的重要育种目标之一是为了建立遗传诊断方法的遗传诊断方法，该方法使用与“稳态性”密切相关的乙烯生物合成相关酶的DNA标记。我们已经透露，可以通过遗传诊断方法将37种日本梨品种的乙烯产量分为三组，这些方法结合了南部杂交的结果，使用两种基因作为到目前为止申请人分离的三种ACC合酶的探针。对这种诊断方法的适应性进行了测试，该方法对托托里大学（OSA 20世纪20世纪的自我生长菌株，OSA 20世纪X Shinsui，Kosui，Kosui，Toyosui，toyosui，atago，atago，jiri等）的适应性进行了测试。此外，由于已建立的遗传诊断方法使用南部杂交使用大量的DNA（10μg）和需要特殊设施的放射性异位素，因此在实际育种地点使用需要改进。因此，我们已经开发了一种使用PCR的应用方法，该方法可以在短时间内用较小的样本（100 ng）进行判断。