ニホンナシ果実の貯蔵性に関する遺伝子診断法の確立

点击翻译按钮获取中文摘要

ニホンナシをはじめとする果樹の育種の問題として、1.実生が結実するまで長年月を要する、2.個体が大きいため広大な圃場を必要とする等1,2年生作物に比べ不利な点が多い。特に果実の重要遺伝形質について評価するためには結実を待たねばならない。このため果樹育種の効率化のためには、実用形質に関連したDNA等の分子マーカーの利用が望まれる。「貯蔵性」という重要な育種目標のひとつについて、「貯蔵性」に密接に関連したエチレンの生合成関連酵素のDNAマーカーを用いて、貯蔵性に関する遺伝子診断法を確立することを目的として実験を行った。これまでに申請者らが単離した3タイプのACC合成酵素の内、2つのタイプの遺伝子をプローブとして用いたサザンハイブリダイゼーションのそれぞれの結果を組み合わせる遺伝子診断法により、ニホンナシ37品種の果実のエチレン生成量を3つのグループに分類できることを明らかにした。この診断法を鳥取大学で育成中の約200系統におよぶ実生集団(おさ二十世紀自殖系統、おさ二十世紀X新水、幸水、豊水、愛宕、慈梨等)に対する適応性を検定し、貯蔵性の遺伝子診断法を確立した。さらに 確立したサザンハイブリダイゼーションを用いた遺伝子診断法では大量(10μg)のDNAおよび特別な施設を必要とするラジオアイソトープ等を使用するため、実際の育種現場で利用するには改良が必要であった。そこでより少量のサンプル(100ng)ですみかつ短時間で判定可能なPCRを利用した応用方法を開発した。