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ファイトアレキシン合成系遺伝子の構造と機能の解析

植物抗毒素合成系统基因结构与功能分析

基本信息

批准号：
10760028
负责人：
吉岡博文
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、ジャガイモのファイトアレキシン合成の鍵酵素である3-Hydroxy-3-methylglutary1 CoA reductase (HMGR)遺伝子の推定プロモーター領域について検討したものである。病原菌接種およびエリシター処理により誘導されるHMG2およびHMG3遺伝子を単離して塩基配列を決定したところ、両ゲノムクローンとも3つのイントロンに分断される構造であった。これらの転写開始点を調べると、両者において翻訳開始コドンからおよそ60〜70塩基上流に複数の転写開始点が認められた。推定プロモーター領域の全長をルシフェラーゼ発現ベクターに組み込み、エレクトロポレーション法でジャガイモ塊茎プロトプラストに導入してプロモーター活性を調べた。HMG2の推定プロモーターでは、HWC処理区においてルシフェラーゼ活性の増加が認められた。デリーションクローンを構築してプロモーター活性を調べた結果、alternative oxidaseのプロモーター領域に見い出されたHFS boxおよびエリシター誘導性の防御遺伝子であるフェニルアラニンアンモニア・リアーゼのシスエレメントであるBox Aの関与が示唆された。同様にHMG3の推定プロモーター活性を調べた結果、エリシター誘導性の防御遺伝子であるカルコン合成酵素のプロモーター領域に見い出されたmyb配列およびフェニルアラニンアンモニア・リアーゼのシスエレメントであるBox Pの関与が浮かび上がってきた。また、デリーションの位置を考慮すると、約300bpの繰り返し配列の一ユニットではHWC誘電能を発揮し、この配列が繰り返されると、逆に抑制効果をもたらすことが考えられる。さらに、この繰り返し配列は、プロモーター活性を全体的に上昇させる機能を有するものと思われた。

This study is aimed to investigate the molecular structure of 3-Hydroxy-3-methylglutary1 CoA reductase (HMGR), a key enzyme in the synthesis of protein. Pathogen inoculation and treatment of HMG2 and HMG3 genes in the isolation of the base alignment of the determination of the structure of the isolation of HMG2 and HMG3 genes. The writing start point is adjusted to 60 ~ 70 degrees. Presuming the length of the field, the development of the field, the introduction of the field activity, the development of the field activity, the development of the field activity, the introduction of the field activity, the field activity, the introduction of the field activity, the field activity, the introduction of the field activity, the field activity, the field activity. HMG2 is presumed to be active in the HWC treated area. The activity of the enzyme is regulated by the activity of the enzyme. In the same way, the putative protein activity of HMG3 was modulated, and the protective gene of HMG3 was induced. In the field of HMG 3, the myb sequence was found in the Box. The position of the detector is considered to be about 300bp, and the detector is arranged to generate HWC induced energy. All the functions of the system are performed in the following ways: