生体バリアー関連分子の同定と機能解析に関する研究

生物屏障相关分子的鉴定及功能分析研究

• 批准号: 10770102
• 负责人: 千葉 英樹
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770102/
• 关键词: レチノイド; 上皮; 臓器内胚芽; F9; タイト結合; 生体バリアー; Cre; lox P; 遺伝子発現誘導; ノックアウト細胞; リガンド誘導性Creリコンビナーゼ; 部位特異的遺伝子組換え; 遺伝子発現誘導システム

タイト結合は、上皮・内皮の最も内腔側に存在する細胞間接着装置で、細胞間の選択的透過性を制御するバリアー機能の本態である。近年いくつかのタイト結合関連分子が見い出されており、その相互作用が生体バリアーの形成・制御に重要な役割を果たすと想定されている。マウスF9細胞株をレチノイン酸存在下で浮遊培養すると、臓側内胚葉細胞に相当する上皮様細胞に分化し、タイト結合が新生される。我々は、リガンド誘導性Creリコンビナーゼを開発し、F9細胞株に部位特異的遺伝子組換え系と遺伝子発現誘導系を導入し、多数の遺伝子の導入・ノックアウトと遺伝子発現の時間的・量的調節が可能な複合システムを開発した(医学のあゆみ,186,705-710,1998;実験医学,17,155-158,1999;1999 FASEB Summer Research Conference)。さらに、この遺伝子改変F9細胞を用いて、レチノイドがタイト結合関連分子の発現とバリアー機能を誘導することを見い出した(投稿準備中)。本細胞株で、タイト結合関連分子の遺伝子を破壊、あるいはその発現を時間的・量的に誘導することによって、タイト結合の構築・機能・制御機構を分子レベルで明らかにすることが可能である。本研究は、生体バリアーの破綻による種々の病態の成立・治療に貴重な情報を提供することが期待される。

The cell adhesion mechanism and the control of the permeability between the cells exist in the most lumen of the epithelium and endothelium. In recent years, the interaction of binding molecules has been found in the formation and control of organisms. F9 cell line was cultured in suspension in the presence of acetic acid, and the epithelial cells were differentiated and regenerated in vitro. In this study, we investigated the development of site-specific gene expression systems and gene expression induction systems in F9 cell lines, the introduction of most genes, the regulation of the amount of time to gene expression, and the development of possible complex gene expression systems.(Medicine, 186, 705 - 710, 1998; Medicine, 17, 155 - 158, 1999;1999 FASEB Summer Research Conference). In this paper, the gene modification of F9 cells in the use of Chinese, Japanese and Japanese binding related molecules to develop and induce the function of Chinese (submission preparation) This cell line is able to induce the expression of genes associated with binding to molecules, such as DNA, DNA This study aims to provide valuable information on the development of disease and treatment in living organisms.

项目成果

Kojima,T.et al.: "Inducation of tight junctions in human connexin 32(hCx32)-transfected mouse hepatocytes:Connexin 32 interacts with occludin."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 266. 222-229 (1999)

Kojima,T.等人：“在人连接蛋白 32(hCx32) 转染的小鼠肝细胞中诱导紧密连接：连接蛋白 32 与 occludin 相互作用。”Biochem.Biophys.Res.Commun.. 266. 222-229 (1999)

千葉英樹: "培養細胞における新しい遺伝子ノックアウト法"実験医学. 17. 155-158 (1999)

千叶秀树：“培养细胞中的新基因敲除方法”实验医学17。155-158（1999）。