慢性関節リウマチの骨芽細胞におけるメタロプロテアーゼの発現に関する研究

类风湿性关节炎成骨细胞金属蛋白酶表达的研究

• 批准号: 10770202
• 负责人: 折口 智樹
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770202/
• 关键词: 慢性関節リウマチ; メタロプロテアーゼ; サイトカイン; アポトーシス; NF-kappaB; シクロオキシゲナーゼ; N-Acetylcysteine

昨年度の研究により、炎症性サイトカインが骨芽細胞上のMT-MMP-1の発現を増強し、MMP-2の活性化を促すことを証明した。今年度は、特にこれらのメタロプロテアーゼの発現メカニズムを解明するとともに、その制御について研究の主眼をおいた。まず、メタロプロテアーゼの転写因子の一つと考えられているNF-kappaBの関与について検討した。骨芽細胞を代表的な炎症性サイトカインであるIL-1betaで刺激すると、NF-kappaBが骨芽細胞の細胞質から核内へ移行することが蛍光免疫染色法によって確認された。さらに核内に移行したNF-kappaBはDNAの特異的なbinding siteに結合してメタロプロテアーゼの発現を誘導することが示唆された。また、炎症性サイトカインによるメタロプロテアーゼの発現誘導は、蛋白(酸素)レベルにおいては通常シクロオキシゲナーゼの活性化に引き続き産生されるプロスタグランデインによりひきおこされると考えられているが、これらのことが骨芽細胞内においてもみられるのか検討した。骨芽細胞をIL-1betaで刺激すると、メタロプロテアーゼ同様、シクロオキシゲナーゼ-2(COX-2)の発現が誘導されることをImmunoblot analysisとRT-PCRを用いてそれぞれ蛋白レベルとメッセンジャーRNAレベルにおいて証明した。さらに、このCOX-2の発現もNF-kappaB関与しているという結果を得た。以上のごとく、メタロプロテアーゼ発現はCOX-2を介しておこなわれており、それらの発現には、NF-kappaBの活性化が関与していることが示唆された。また、最近、NF-kappaBの活性化にレドックスシステムの関与が示唆されている。そこで、骨芽細胞においてIL-1betaで誘導されるNF-kappaBの核内移行、COX-2の発現が抗酸化剤で制御されるか検討した。NF-kappaBの核内移行、COX-2の発現ともに抗酸化剤の一つであるN-Acetylcysteine(NAC)で抑制することに成功した。以上のことから、NACをはじめとする抗酸化剤がNF-kappaBの活性化を制御することによって、慢性関節リウマチ等の炎症性骨疾患の骨破壊病変において産生されるメタロプロテアーゼの誘導を制御する可能性を示唆した。

This study demonstrated that inflammatory cytokines enhance the expression of MT-MMP-1 and promote the activation of MMP-2 in bone bud cells. This year, the main focus of research is on the development of new technologies and technologies. The NF-kappaB is the key to the success of the project, and it is the key to the success of the project. Bone bud cells are represented by inflammatory cells stimulated by IL-1beta and NF-kappaB, and cytoplasmic nuclear migration of bone bud cells is confirmed by light immunostaining. NF-kappaB binds to DNA at specific binding sites, and induces the development of DNA. The development of inflammatory cells is usually induced by the activation of protein (acid). The expression of COX-2 (COX-2) was induced by IL-1beta in bone marrow cells. Immunoblot analysis and RT-PCR were used to demonstrate the expression of COX-2 in bone marrow cells. In the meantime, the discovery of COX-2 and NF-kappaB is related to the development of COX-2. The activation of NF-kappaB is related to the development of COX-2. Recently, NF-kappaB has been activated in various ways. IL-1beta induced NF-kappaB migration, COX-2 production, and anti-acidification inhibition in osteoblasts were investigated. N-Acetylcysteine(NAC) successfully inhibits the intracellular migration of NF-kappaB and the production of COX-2. The above results show that the anti-acidification agent can inhibit the activation of NF-kappaB, and the possibility of inhibiting the induction of NF-kappaB in bone fracture diseases such as chronic joint diseases.

项目成果

Tomoki Origuchi,et al: "IL-1beta-mediated ezpression of membrane type matrix-metalloproteinase in human osteoblasts"Clinical and Experimental Rheumatology. (発表予定). (2000)

Tomoki Origuchi 等人：“人成骨细胞中 IL-1β 介导的膜型基质金属蛋白酶表达”《临床和实验风湿病学》（即将发表）。