GM-CSFレセプターα鎖に結合する分化誘導分子p70に関する研究

与GM-CSF受体α链结合的分化诱导分子p70的研究

• 批准号: 10770512
• 负责人: 色摩 弥生
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Fukushima Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770512/
• 关键词: GM-CSFレセプター; レセプター結合蛋白; 骨髄異形成症候群

1.p70の精製;抗ヒトGMRα鎖モノクローナル抗体結合プロテインAビーズカラムに、ヒトGMRα鎖を強発現しているBa/F3細胞株(マウス由来)の蛋白可溶成分を流しこみ、ヒトGMRα鎖を分離抽出した。SDS-PAGEにより、GMRα鎖とともに得られたp70を分離したが、シークエンス解析が可能な収量には末だ至っていない。2.p70の発現;ヒト血液細胞におけるGMRとp70の発現を検討するため、健常者、血液疾患患者の末梢血白血球及び骨髄細胞を用いて抗ヒトGMRα、β鎖モノクローナル抗体による免疫沈降を試みた。しかし、細胞あたりのGMR発現量自体が疾患によって大きく異なること、GMRα鎖結合p70は微量であり、免疫沈降法での解析は困難であることが判明した。3.骨髄異形成症候群(MDS)におけるGMR発現量の解析;血液疾患の中でも、半数以上の例で発現低下が認められたので、末梢血白血球を対象に、フローサイトメトリー法とKolmogorov-Sminov testによる定量的解析を行った。GMRβ鎖は、白血病化のリスクの高い病期の好中球で有意に発現が低下しており、α鎖については、病期とは無関係な発現低下例が認められた。

1. Purification of p70; isolation and extraction of soluble protein components from Ba/F3 cell line (from which it originated) by anti-GMR alpha lock antibody binding to p70 and strong expression of GMR alpha lock. SDS-PAGE analysis shows that the p70 is separated from the GMRα-lock, and the p70 is separated from the GMR α-lock. 2. p70 detection; detection of GMR p70 in peripheral blood leukocytes and bone marrow cells of healthy individuals and patients with hematological disorders; and immunoprecipitation assay using anti-GMR alpha and beta antibodies. GMR detection is difficult to detect by immunoprecipitation method. 3. Analysis of GMR findings in MDS; analysis of GMR findings in more than half of cases of blood disorders; analysis of peripheral leukocytes; Kolmogorov-Sminov test; GMRβ lock, leukaemia, high disease stage, high disease stage, low disease stage, low disease