インターロイキン13レセプターの構造とシグナル伝達機構の検討

白细胞介素13受体结构及信号转导机制研究

• 批准号: 10770513
• 负责人: 村田 興
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770513/
• 关键词: インターロイキン13; シグナル伝達; Yeast Three hybrid法; 遺伝子治療; アデノウイルスベクター; イムノトキシン; インターロイキン 13

IL-13Rα'の細胞内ドメインのリン酸化チロシンに結合する蛋白質を得るためYeast ThreeHybrid法でスクリーニングを行い、IL-13Rα'に結合する未知の遺伝子c28をクローニングした。c28はYeast Three-hybrid及びYeast Two-hybridどちらの実験系でもIL-13Ra'と結合した。またチロシンリン酸化は必要ないことがわかった。c28はBLAST searchの結果ドイツのグループがそのcDNAの部分配列を報告したDKFZp434のC末部分とDNAレベルで100%一致していることが判明した。この蛋白に関しては詳細は不明だがドメインサーチでc末にCoiled-Coilをもち(この部分でIL-13Rと結合すると推測される)、また核移行シグナルをもつことがわかった。またわれわれはヒト組織mRNAをブロッティングしたメンブレン(Clontech社製およびTOYOBO社製)を用いたノーザンブロッティング法でc28の組織分布を検討した。c28は4.5kbおよび2.5kbのmRNAをもち、ubiquitousに発現しているがとくにTestisで強いシグナルが認められた。我々はその全長をクローニングするべくヒト胎児肝cDNAライブラリ(1Trip1EX/CLONTECH)を用いて、バックスクリーニングをおこなったが、N末をクローニングすることができなかった。次にヒトtestis-cDNAライブラリから5'-RACE-PCR法をもちいてN末のクローニングを行い、ほぼ全長と思われるmRNA2.2kBのクローニングに成功した。現在、クローニングした新規遺伝子c28の性質を解析中である。

IL-13R α's intracellular protein binding protein was obtained by the Yeast ThreeHybrid method, and IL-13R α's protein binding protein c28 was obtained by the Yeast ThreeHybrid method. c28 Yeast Three-hybrid and Yeast Two-hybrid It is necessary to change the acidity of the acid. c28 BLAST search results were 100% consistent with the partial alignment of the cDNA of DKFZp434. The details of this protein are unclear. The end of the protein is Coiled-Coil. The tissue distribution of c28 was studied by using the Clontech system and TOYOBO system. c28 is 4.5kb and 2.5kb in length. The full length of the cDNA sequence (1Trip1EX/CLONTECH) was used to identify the cDNA sequence. In addition, the 5'-RACE-PCR method was successfully used to detect and detect mRNA 2.2kB. Now, the nature of the new gene c28 is analyzed.