高濃度グルコースによるメサンギウム細胞増殖、気質産生にたいするセラミドの作用

方法:subconfluentまで増殖したヒトメサンギウム細胞の培地を0.5%FBS添加DMEMに変換、72時間後より各々の群で経時的にノザンブロット、ウエスタンブロットを施行した。(a)コントロール群:(6mMグルコース含有培地)(b)高濃度グルコース群(30、150mMグルコース)(c)C2セラミド群:(6mMグルコース+C2セラミド(0.02-20pM)(d)高濃度グルコース、C2セラミド群:(30mMグルコース+C2セラミド)(e)TGFβ、C2セラミド投与群:TGFβ+C2セラミド結果:1、高濃度グルコースは6-150mMの範囲で濃度依存性にα-SMA、b-FGF、PDGF、TGFβ、コラーゲン(typeIV)、フィブロネクチンmRNA、タンパクを増加させる傾向を認めた。2、C2セラミド単独では0.02-2pMの範囲で濃度依存性にα-SMA、b-FGF、PDGF、TGFβ、コラーゲン(typeIV)、フィブロネクチンmRNA、タンパクを減少させ、20pM以上でapotosisを誘導する傾向を認めた。3、高濃度グルコース、C2セラミド同時投与した場合、0.02-2pMではC2セラミドの濃度依存性に高濃度グルコースによる上記分子のmRNA、タンパク誘導を抑制した。4、TGFβ+C2セラミド投与は0.02-2pMの範囲でC2セラミドの濃度依存性にTGFβによるα-SMA、コラーゲン(typeIV)、フィブロネクチンmRNA、タンパクの増加を抑制する傾向を認めた。

方法:subconfluentまで増殖したヒトメサンギウム細胞の培地を0.5%FBS添加DMEMに変換、72時間後より各々の群で経時的にノザンブロット、ウエスタンブロットを施行した。(a)コントロール群:(6mMグルコース含有培地)(b)高濃度グルコース群(30、150mMグルコース)(c)C2セラミド群:(6mMグルコース+C2セラミド(0.02-20pM)(d)高濃度グルコース、C2セラミド群:(30mMグルコース+C2セラミド)(e)TGFβ、C2セラミド投与群:TGFβ+C2セラミド結果:1、高濃度グルコースは6-150mMの範囲で濃度依存性にα-SMA、b-FGF、PDGF、TGFβ、コラーゲン(typeIV)、フィブロネクチンmRNA、タンパクを増加させる傾向を認めた。2、C2セラミド単独では0.02-2pMの範囲で濃度依存性にα-SMA、b-FGF、PDGF、TGFβ、コラーゲン(typeIV)、フィブロネクチンmRNA、タンパクを減少させ、20pM以上でapotosisを誘導する傾向を認めた。3、高濃度グルコース、C2セラミド同時投与した場合、0.02-2pMではC2セラミドの濃度依存性に高濃度グルコースによる上記分子のmRNA、タンパク誘導を抑制した。4、TGFβ+C2セラミド投与は0.02-2pMの範囲でC2セラミドの濃度依存性にTGFβによるα-SMA、コラーゲン(typeIV)、フィブロネクチンmRNA、タンパクの増加を抑制する傾向を認めた。