ビリダンスレンサ球菌の赤血球凝集活性に関連する菌体表層抗原の分子遺伝学的解析

草绿色链球菌血凝活性相关细菌表面抗原的分子遗传学分析

• 批准号: 12771098
• 负责人: 高橋 幸裕
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: The Nippon Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12771098/
• 关键词: ビリダンスレンサ球菌; Streptococcus gordonii; 赤血球凝集活性; シアル酸; 遺伝子欠損株; 付着因子

ビリダンスレンサ球菌の一種であるStreptococcus gordoniiは赤血球凝集活性を持ち、研究代表者らは既に、その活性は糖を多量に含む菌体表層抗原(Hs抗原)によることを示した。また、Hs抗原をコードする遺伝子(hsa遺伝子)のクローニングを行い、hsa遺伝子の塩基配列より、この遺伝子は、2,178アミノ酸残基からなるポリペプチド(Hsa)をコードしていて、Hsaはセリンに富んだ2つの領域とグラム陽性菌のcell wall anchoring motifを有していてることが推定された。本研究は、hsa遺伝子がHs抗原の構造遺伝子であるという更なる確証を得るために、S.gordonii遺伝子欠損株を作製し、この欠損株が赤血球凝集活性を欠いていることを確認した上で、hsa遺伝子を再移入し、赤血球凝集活性が回復することを確認することを目的として行った。平成12年度の研究では、S.gordonii DL1株のhsa遺伝子欠損株(Δhsa株)を作製し、Δhsa株が、赤血球凝集活性および抗Hs抗体との凝集能の何れも欠如していることを既に確認した。本年度の研究では、resident plasmid integration法[Shiroza, T. et al.(1998) Gene,207:119-126]を用いて、このΔhsa株へhsa遺伝子を再移入させ、Δhsa株で欠如した上記の付着活性およびHs抗原性が回復することを確認できた。さらに、cell wall ahchoring motifを欠いたHsaをコードする遺伝子領域のみを再移入しても、Hs抗原の発現はウェスタンブロット法で検出できたが、付着活性は回復しないことも明らかになった。現在、S.gordoniiのHs抗原が関与している付着の標的となる赤血球膜成分について検討中である。

A species of Streptococcus gordonii has high hemagglutination activity, and its research representatives have high levels of bacterial surface antigen (Hs antigen). Hs-antigen-related gene (hsa gene) was identified in the sequence, hsa gene base alignment, hsa gene, 2,178 amino acid residues, Hsa gene, Hsa gene. In this study, we confirmed that the structural gene of hsa gene was reintroduced into S.gordonii gene, and the hemagglutination activity of S.gordonii gene was restored. In the study conducted in 2012, S.gordonii DL1 strain was identified as having poor hemagglutination activity and anti-Hs antibody agglutination activity. This year's research is based on the resident plasmid integration method [Shiroza, T. et al. (1998) Gene,207:119-126] The hsa gene of the Δ hsa strain was reintroduced and the Δhsa strain was not recognized as active or antigenic. In addition, the cell wall ahchoring motif is not in the middle of the cell wall. The cell wall ahchoring motif is in the middle of the cell wall. The cell wall ahchoring motif is in the middle of the cell wall. Now, S.gordonii's Hs antigen is related to the target of red blood cell membrane composition.

项目成果

Yukihiro Takahashi, Kiyoshi Konishi, John O.Cisar, Masanosuke Yoshikawa: "Identification and characterization of hsa, the gene encoding the sialic acid-binding adhesin of Streptococcus gordonii DL1"Infection and Immunity. 70・3. 1209-1218 (2002)

Yukihiro Takahashi、Kiyoshi Konishi、John O.Cisar、Masanosuke Yoshikawa：“hsa（编码戈登链球菌 DL1 唾液酸结合粘附素的基因）的鉴定和特征”感染和免疫 70・3。