出芽酵母の細胞極性形成におけるアクチン再構成の分子機構の解析

酿酒酵母细胞极性形成过程中肌动蛋白重组的分子机制分析

• 批准号: 12780529
• 负责人: 鎌田 このみ
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12780529/
• 关键词: 出芽酵母; 細胞極性; アクチン; タイプIミオシン; 膜タンパク質; エンドサイトーシス; エンドソーム; CDC50; 温度感受性変異; 膜局在

出芽酵母の細胞極性形成におけるアクチン再構成の分子機構を明らかにするために、本研究ではタイプIミオシンに注目して解析を行った。平成12年度において、タイプIミオシンの温度感受性変異株を作製し、それを用いてタイプIミオシンと遺伝学的相互作用する因子としてCDC50を同定した。CDC50遺伝子産物(Cdc50p)は、これまでにほとんど機能を明らかとされていないが、相同性のあるタンパク質が酵母からヒトまで真核生物に広く存在し、基本的な生命活動に重要な役割をしている可能性が示唆されている。平成13年度は、このCdc50pの機能についてさらに詳細に解析した。まず、Cdc50pの細胞内局在を検討したところ、Cdc50pは界面活性剤により可溶化される膜タンパク質であった。ショ糖密度勾配遠心による細胞分画、また、間接蛍光抗体法による免疫染色実験から、Cdc50pは後期エンドソームに局在することを明らかにした。次に、CDC50遺伝子破壊株(cdc50Δ)を用いて、Cdc50pの細胞内での役割を調べた。cdc50Δ変異株は低温において、野生型よりも丸く極性を失った形態を示し、また、多くの細胞は小さな芽を出した状態で増殖を停止する。この時の細胞の状態を、細胞生物学的に詳細に解析し、以下のことを明らかにした。1)アクチンの細胞内局在が異常となる。2)エンドサイトーシスの後半の過程である、液胞への輸送が異常となる。3)細胞極性形成に重要な役割を果たしていることが知られている因子である、Gic1p、Bni1pの細胞内局在が異常となる。これらのことから、Cdc50pは、後期エンドソームに局在し、細胞の極性形成に関わる因子の局在を直接的(あるいは間接的)に制御することを通して、細胞極性形成を調節している重要なタンパク質であることが示唆された。

The molecular mechanism of cell polarity formation in budding yeast was studied. The temperature sensitivity of the plant was controlled by the temperature sensitivity factor in the 12th year of Heisei, and the temperature sensitivity factor in the 12th year of Heisei was controlled by the temperature sensitivity factor in the 12th year. CDC50 gene product (Cdc50p) has the potential to exist in eukaryotes and to perform essential services for essential life activities. Heisei 13 years ago, this Cdc50p features detailed analysis Cdc-50p is an active agent in the cellular system. Cdc50p is a new method for the determination of glucose concentration in cells by indirect fluorescent antibody staining. In addition, CDC50 gene fragments (cdc50 Δ) were used to modulate intracellular activity of Cdc50p. cdc50 Δ mutant plants are in the low temperature state, wild type plants are in the low polarity state, and many cells are in the low temperature state. The state of cells at this time, cell biology, detailed analysis, the following is clear. 1) The cellular structure is abnormal. 2) The second half of the process of ENDS is unstable, and the transportation of liquid cells is abnormal. 3)Cell polarity formation is important for understanding the role of factors such as Gic1p and Bni1p in cellular processes. Cdc50p is a key factor in the regulation of cell polarity formation.

项目成果

Mochida, Junko: "The novel adaptor protelnm, Mtl1p, and vrp1p, a homologue of Wlskott-Aldrich syndrome protein-interacting proteln(WIP), may atagonistically regulate type I myoslns In Saccharomyces cerevisiae"Genetics. (in press). (2002)

Mochida, Junko：“新型接头蛋白 Mtl1p 和 vrp1p 是 Wlskott-Aldrich 综合征蛋白相互作用蛋白 (WIP) 的同源物，可能会拮抗地调节酿酒酵母中的 I 型肌球蛋白”遗传学。