間葉系幹細胞を安全利用するための保存後性状変化解析とそれに基づく至適保存法の確立
分析安全使用间充质干细胞储存后的性质变化,并据此建立最佳保存方法
基本信息
- 批准号:15H00587
- 负责人:
- 金额:$ 0.38万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
- 财政年份:2015
- 资助国家:日本
- 起止时间:2015 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
間葉系幹細胞(MSC)は、多分化能を有すると共に抗炎症作用や免疫抑制作用も持ち合わせるため再生医療や難治性炎症性疾患に対する細胞療法剤として有望視されている。実際にカナダにおいては、難治性graft versus host diseaseに対する医薬品(Prochymal®)として認可された。当院でもMSCの造血支持能力や骨再生能力に着目した臨床試験(独自シーズ)を計画している。臨床で用いられている血液細胞製剤(濃厚赤血球液等)は、適切な保存方法や保存経過中における細胞や電解質の変化等について解析が行われており安全性や品質が担保されているが、MSCの凍結方法の検討や融解後の細胞変化についての知見は、ほとんど無いといってよい。実際にProchymal®の臨床試験においては、血栓症や血圧低下などの重篤な副作用が報告された。これらの原因として、細胞凝集塊形成(MSCは、もとより接着性が高い)、融解により崩壊した細胞からの内容物(DNAや電解質など)の放出等による可能性がある。また凍結保存によりMSCとしての品質が低下することも否定出来ない。本研究においてはMSCを複数の方法により凍結保存し、融解後にその性状を解析する。樹立されたばかりのプライマリーな細胞は増殖能の低下が著しく、当初予定していた保存細胞数を確保するのに苦慮した。また、細胞保存液の量も再検討を加え、液量に見合った保存チューブの形状も決定した。さらに、施行可能な保存細胞数から逆算し、保存液量、保存温度、保存期間等を適宜改変した。現在MSCを2ロット保存しており、予定された保存期間を過ぎた時点で融解しそれぞれ解析していく予定である。
Mesenchymal stem cells (MSCs) are expected to have anti-inflammatory and immunosuppressive effects in regenerative medicine and cell therapy for refractory inflammatory diseases. In fact, the treatment of refractory graft versus host disease is approved by Prochymal®. The hematopoietic support capacity and bone regeneration capacity of MSC in the hospital were studied in clinical trials (alone). Clinical use of blood cell preparation (concentrated red blood cell fluid, etc.), appropriate preservation method, preservation process, cell and electrolyte transformation, etc., analysis of safety, quality assurance, analysis of MSC freezing method, knowledge of cell transformation after melting, etc. During clinical trials of Prochymal®, serious side effects such as thrombosis, low blood pressure, etc. have been reported. There is a possibility that the causes of this phenomenon, cell aggregate formation (MSC adhesion is high), and the release of cell contents (DNA and electrolytes) due to melting may occur. The quality of the frozen MSC is low. In this study, we analyzed the characteristics of MSC after freezing and thawing. The number of cells preserved in the culture medium is carefully determined. In addition, the amount of cell preservation solution is re-examined and increased, and the amount of solution is determined according to the shape of the preservation tube. In addition, the number of cells that can be preserved, the amount of preservation solution, the temperature of preservation, and the duration of preservation can be changed appropriately. The MSC is now stored for a predetermined period of time.
项目成果
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专著数量(0)
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