トロンボモジュリン遺伝子導入により安全性を高めた間葉系幹細胞の作成

通过引入血栓调节蛋白基因创建安全性更高的间充质干细胞

• 批准号: 26930010
• 负责人: 高 四強
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: Aichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26930010/
• 关键词: 間葉系幹細胞(MSC); トロンボモジュリン; 抗血栓性

間葉系幹細胞(MSC : mesenchymal stem/stromal cell)は、免疫抑制、抗炎症作用を有するため治療抵抗性炎症性疾患に対する細胞療法剤としての臨床応用が開始されている。また神経細胞等への分化能を有するため再生医療の細胞ソースとしても期待が高まっている。このようにヒトへの投与が、広く行われるようになってきたが、全身投与をすると肺、心臓、脳などに血栓症が生じ重篤な状態を引き起こすという報告がなされている。また、その分子生物学的機序も明らかになってきた。血栓形成はそれ自体臓器障害を引き起こすのみならず、炎症を惹起することも知られており、この問題を解決することは急務と考えられる。そこで我々は、抗血栓性蛋白であるトロンボモジュリン(TM : thrombomodulin)をレンチウィルスによりMSCへ遺伝子導入することを着想した。遺伝子組換えTM(リコモジュリン®)は播種性血管内凝固症候群治療薬として保険適応となっており、ヒトでの有効性、安全性が確認されている。またTMのもつ抗炎症作用もヒトにおいて報告されている(J Trauma Acute Care Surg, 2012)。つまり、TMを安定発現しているMSCは、投与時の安全性が高いばかりでなく、抗炎症作用も強力であることが予想される。この構想をもとに実験を進めた。レンチウイルス発現用ベクターのクローニングを終え、リコモジュリンのコーディング領域の塩基配列シークエンスを確認した。また、293T細胞を用いて、ベクターに組み込まれた標識蛍光物質の発光量をもとに、Transductionの成功を確認した。次いでTMの発現も確認できたが、MSC細胞内でTMを発現させる段階で研究期間を終えた。研究は現在も継続して行っており、今後、炎症性疾患モデルマウス(ブレオマイシン肺障害等)において治療効果が、コントロールMSCと比較して高いかを病理学的に評価する予定である。

Mesenchymal stem/stromal cells (MSC) have immunosuppressive and anti-inflammatory effects and are beginning to be used in cell therapy for resistant inflammatory diseases. There are high expectations for the improvement of cells in regenerative medicine if differentiation capabilities such as neurons can be achieved. This is the first time that a patient has been diagnosed with a serious condition such as pulmonary thrombosis, cardiac thrombosis, or thrombosis. The mechanism of molecular biology is very clear. Thrombosis is caused by organ dysfunction, inflammation, and the like. The antithrombotic protein (TM : thrombodulin) was introduced into MSC cells. The efficacy and safety of the sub-group TM(RCT ®) for the treatment of SEDS is confirmed. The anti-inflammatory effect of TM is reported in the journal J Trauma Acute Care Surg, 2012. MSC is safe when administered and has a strong anti-inflammatory effect. This is a good idea. To confirm the base configuration of the domain of the mobile phone, the mobile phone is used for the development of mobile phones. 293T cells were used to identify the amount of light emitted by the fluorescent substance and to confirm the success of the transmission. The second phase of TM discovery was confirmed, and the second phase of TM discovery in MSC cells was completed. The study is aimed at determining the therapeutic effects of inflammatory diseases such as lung disease, lung disease, etc., and comparing MSC with high levels of inflammatory diseases in the future.