母体側スフィンゴ脂質環境が胚発生や着床におよぼす影響

母体鞘脂环境对胚胎发育和着床的影响

• 批准号: 15H00596
• 负责人: 宮本 智美
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015 至 2016
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15H00596/
• 关键词: Ceramide transfer protein(Cert); グルコシルセラミド合成酵素; 不妊症・不育症

研究目的 : スフィンゴ脂質(SL)生合成系に関わる転移酵素のノックアウトマウス(KOM)は胎生致死であることが多く, SLの骨格となるセラミドの輸送に関わるCeramide transfer protein(Cert)のKOMも例外ではない。Cert欠損へテロ接合体(CertKOHe)は野生型の表現型と顕著な差は見られない。しかしながら, 野生型雌マウスとCertKOHe雄マウスの交配で生まれてくる仔の匹数に比べ, CertKOHe雌マウスと野生型雄マウスの交配で生まれてくる仔の匹数が少ない傾向にあった。胚の発生や着床にもセラミドが関与している事が報告されていることから, 本研究では, KOMが胎生致死であるCertおよびスフィンゴ糖脂質(GSL)合成のキーエンザイムであるグルコシルセラミド合成酵素(Ugcg)のへテロ接合体(UgcgKOHe), CertとUgcgふたつの遺伝子のへテロ接合体(CertKOHe/UgcgKOHe)を用いて, 受精から発生の間におけるSLが及ぼす影響を調べ, 不妊症あるいは不育症のモデルとなるか検討した。研究方法 : 受精卵の遺伝型の違いによる影響を避けるため, 雌マウスは精管結紮雄マウスと交配して膣栓が確認できたものを偽妊娠マウスとし, C57BL/6の前核期受精卵をC57BL/6およびCertKOHe, UgcgKOHe, CertKOHe/UgcgKOHeの卵管に移植した。移植時には卵管膨大部の有無も確認し, 着床後の胚の形態および着床数を調べた。研究結果 :1、偽妊娠マウスはいずれの遺伝型の母体でも卵管膨大部がない場合は, 100%着床しなかった。2、移植後11日目に着床数および胚の形態を確認したところ, C57BL/6は移植した7割の前核期受精卵が着床し, 8割が正常に発生した。CertKOHeおよびCertKOHeUgcgKOHeは移植した前核期受精卵の5割が着床し, 正常に発生していたのは半数だった。一方, UgcgKOHeは移植した前核期受精卵は3割しか着床せず, そのうち6割が正常に発生した。以上の結果より, UgcgKOHe雌マウスは着床が成立しにくいことが示唆された。また, CertKOHeおよびUgcgKOHe, CertKOHeUgcgKOHe雌マウスはいずれも野生型に比べ正常な胚発生を半数しか維持できないことが示唆された。

研究目标：参与鞘脂（SL）生物合成系统的转移酶的基因敲除小鼠（KOM）通常是致命的胚胎寿命，而与形成SL骨架的神经酰胺相关的神经酰胺转移蛋白（CERT）的Koms也不例外。缺乏证书的杂合子（certkohe）与野生型表型没有任何显着差异。但是，与野生型雌性小鼠和certkohe雄性小鼠之间交配所生的幼崽数量相比，倾向于幼虫和野生型雄性小鼠之间的交配数量较小。据报道，神经酰胺也参与了胚胎发育和植入，在这项研究中，我们研究了使用杂合子（UGCGKOHE）对葡萄糖基素质合成酶（UGCG）（UGCG）的生育能力和发育之间的SL的影响，这是一种关键酶，是Vivina andGlycosphingolipid（gsosposphingolipid）的合成（gsosposposposposposposposposposposposposposposposposposposphingolipid） （certkohe/ugcgkohe）用于开发CERT和糖磷脂（GSL）的两个基因（certkohe/ugcgkohe），以及在肥料和发育之间的杂合子（certkohe/ugcgkohe）之间，以及在肥料和发育之间以及检查是否可以使其成为不谦虚或不衰弱的模型。研究方法：为避免受精卵基因型差异的影响，将雌性小鼠与雄性小鼠饲养有VAS延迟的雄性小鼠，并发现作为假性小鼠的阴道塞，并将C57BL/6的尖核肥卵植入C57BL/6和CERTKGKOHEHE，UGCGKOHEEHEE，UGCGKKOHEEHEE，UGCGKKOHEE， certkohe/ugcgkohe/ugcgkohe。在植入过程中，还检查了输卵管的存在或不存在，并检查了植入后胚胎的形态和植入数量。研究结果：1。当在任何基因型的孕产妇中都不存在卵形膜时，假性小鼠100％不植入。 2。当我们在植入后的第11天确认植入计数和胚胎形态时，将70％的前核阶段受精卵植入了C57BL/6中，而80％的卵子正常。 50％的植入前核阶段受精卵植入了certkohe和certkoheugcgkohe，通常发生了一半的卵。另一方面，只有30％的植入的ugcgkohe植入液肥卵，其中60％是正常的。以上结果表明，雌性UGCGKOHE小鼠很难植入。还建议，与野生型相比，只有一半的女性Certkohe，ugcgkohe和certkohe ugcgkohe小鼠能够保持正常的胚胎发育。