沖縄県におけるヒト免疫不全ウイルスおよびB型肝炎ウイルス重複感染の現状調査

冲绳县人类免疫缺陷病毒与乙型肝炎病毒合并感染现状调查

• 批准号: 15H00628
• 负责人: 渡嘉敷 良乃
• 金额: $ 0.32万
• 依托单位: University of the Ryukyus
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15H00628/
• 关键词: ヒト免疫不全ウイルス; B型肝炎ウイルス; 重複感染

本研究課題は、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)およびB型肝炎ウイルス(HBV)に重複感染している患者検体を対象とし、分離されたHIVについては分子系統樹を、HBVについてはゲノタイプ判定を行い、それらの情報を総合的に解析することで、沖縄県におけるHIV感染状況の特徴を明確にし、感染防止対策に貢献することを目的とした。2008年から2015年の期間に当院においてHIV陽性であった686検体のうち、HBsAg陽性の重複感染検体8件(1.02%)の患者血漿を用いて解析を行った。HBVゲノタイプはEIA法による4種類のPreS2抗原エピトープの検出パターンにより判定を行った。またHIVの遺伝子解析には、血漿よりRNAを抽出し逆転写、増幅後にnestedPCRを行って得られたDNAサンプルを使用した。精製したDNAサンプルの塩基配列をダイレクトシークエンス法にて解析し、MEGA6解析ソフトにおいてロスアラモスのHIVデータベースよりリファレンスを得て分子系統樹を作成した。解析した8検体のHBVゲノタイプは6件がゲノタイプA、1件がゲノタイプD、1件はHBs抗原量が低値のため判定保留となった。HIVのシークエンスデータより分子系統樹を、最尤法(MJ法)ならびに近隣接合法(NJ法)にて作成したところ、HBVゲノタイプがAと判定された6件と判定保留であった1件はすべての分離株においてHIVサブタイプBグループに属していた。さらに、これらのうち4件はBグループの中で独自のクラスターを形成しており、HBVゲノタイプもA型と共通していたことから、同一人物由来の遺伝子または亜型の可能性が示唆された。HBVゲノタイプDの1検体についてはPCRにおけるDNA増幅不良のため今回はシークエンスデータを得ることができなかった。今後は、今回HIVシークエンスデータが得られなかったHBVゲノタイプD症例の再解析を含め、より多くの症例のデータを蓄積し解析していくことにより沖縄県における感染状況の特徴を明らかにすることが必要と考えられた。

This study aims to identify, isolate, analyze, characterize, and contribute to infection prevention strategies for HIV patients with multiple infections due to HIV and hepatitis B virus (HBV). During the period from 2008 to 2015, 686 HIV-positive cases and 8 HBsAg positive cases with repeated infection were analyzed by plasma analysis. HBV is the most common type of virus in the world. HIV gene analysis, plasma RNA extraction, reverse transcription, amplification and DNA sequencing The molecular phylogenetic tree was constructed by analyzing the sequence of DNA fragments and DNA sequences in MEGA6. The analysis of HBV antigen in 8 samples showed that 6 samples were classified as A, 1 sample was classified as D, and 1 sample was classified as low value. HIV DNA sequence analysis, MJ method and NJ method were used to determine the sequence of HIV DNA sequences. HBV DNA sequence A was determined by 6 DNA sequences and 1 DNA sequence was determined by 1 DNA sequence. In addition, the possibility that HBV type A is common and the same person is derived from the same person is shown. HBV DNA amplification is not good, but it can be used to detect DNA in the first sample. In the future, we will review the characteristics of HIV infection status and analyze the accumulation of HBV infection cases.