ため池の微小動物消化管内酵素の性質と体外での挙動および底質改善に果たす役割

水库小动物消化道酶特性、体外行为及其改善底质的作用

• 批准号: 18H00285
• 负责人: 三浦 靖弘
• 金额: $ 0.28万
• 依托单位: 大阪府立今宮工科高等学校
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18H00285/
• 关键词: セルラーゼ; 土壌吸着; 酵素の真空凍結乾燥

ため池や水路に住む甲殻類、巻貝を実験生物として、それら生物の消化管内のセルラーゼについて実験を行い次のような結果を得た。①特定の餌だけで一カ月間飼育した後、消化管内セルラーゼ活性を比較したところ、いずれもセルロースの割合が高い餌で飼育した時に活性が高くなった。巻貝より甲殻類において差が顕著であった。その際のセルラーゼ分子量をザイモグラフィーで調べたところ、餌の種類に関係なく同一種ではほぼ同じようなバンドパタンとなった。ただ、クロレラを餌としたヒメタニシが、他の餌の場合と若干異なるバンドを有していた。②微小動物を飼育していた系の底泥を、CMC水溶性内に投入し、その後生成される還元糖量を650時間以上に渡って測定した。生成される還元糖が減少に転じたら、溶液の一部を新たなCMC溶液と交換し基質が欠乏しないようにした。その結果、土壌に吸着されたセルラーゼは650時間を経過しても高い活性を維持し続けた。生成される還元糖は周期的な変動を行うが、土壌には還元糖を完全に分解する酵素も吸着されており、その活性も長期間維持されるからであると考えている。③粗酵素中のセルラーゼ活性を比較するには、得られた粗酵素のタンパク量を測定し、単位タンパク量あたりの活性を比較しなければならない。しかし、個人的研究においては、タンパク量の測定は煩雑なうえ試薬が高価でなかなか常套化できない。そこで、生体や土壌を真空凍結乾燥し、その単位重量あたりの活性を比較することを試みようとしている。手始めとして、甲殻類(生体そのまま)や巻貝(消化管)をPBS溶液中でホモジナイズしたものを3等分し、すぐ、冷凍後、冷凍―真空凍結乾燥後にセルラーゼ活性を比較した。その結果、いずれの場合も真空凍結乾燥後のサンプルが顕著に高い活性を示した。この原因として、ホモジナイズ溶液中のセルラーゼは沈殿した生体残滓等に相当量付着したままで反応に関与できないのに対し、真空凍結乾燥することで大部分のセルラーゼがむき出しの状態となり酵素反応が活発になったのではないかと推定している。また、セルラーゼを吸着した土壌を真空凍結乾燥すると、セルラーゼの活性が著しく低下した。この原因は不明で、今回ほとんど手がつけれなかったプロテアーゼの挙動とともに今後の検討課題である。

In the water channel, the crustaceans and shellfish live in the digestive tract of the organisms. 1. The activity in digestive tract was higher than that in normal diet. The crustaceans are in the middle of the sea. The relationship between molecular weight and species is the same. There are a number of different types of food and beverages. (2) The amount of sugar recovered after feeding of micro-animals was determined at least 650 days after feeding of sediment and CMC. A part of the solution is new, and the CMC solution is deficient in the matrix. As a result, the absorption rate was 650%, and the activity was maintained. The enzyme adsorption and activity of the enzyme are maintained for a long time. 3. Compare the activity of crude enzyme with the activity of individual enzyme. For personal research, the measurement of the quantity of the sample is usually carried out in a highly specialized way. For example, if the organic matter is vacuum freeze-dried, the activity of the organic matter is compared with that of the organic matter. To compare the activity of crustaceans (organisms) and shellfish (digestive tract) in PBS solution after freezing, freezing and vacuum freeze-drying. The results showed that the activity of the product was high after vacuum freeze drying. The reason for this is that a considerable amount of biological residue in the solution is responsible for the reaction and vacuum freeze-drying of most of the enzyme. The moisture content of the soil was reduced by vacuum freezing and drying. The reason for this is unknown, and the problem is discussed in the future.