ハナシノブの自生地における雑種個体の検出法に関する研究

自然栖息地花信杂交个体检测方法研究

• 批准号: 19915004
• 负责人: 稲葉 一文
• 金额: $ 0.49万
• 依托单位: 熊本県教育庁文化課
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19915004/
• 关键词: ハナシノブ; 交雑; 種の保存

1研究目的ハナシノブは、阿蘇地方に自生する日本固有種で、環境省により日本野生生物の希少植物に指定された貴重な植物である。近年本種は急速に減少し、平成9年のレッドリストでは最も危険度の高い絶滅危惧種IA類に位置づけられた。減少の要因は、自生地である原野の減少と盗掘が最も大きいと考えられている。さらに平成10年からは近縁種との交雑の危険性も指摘されている。もし、自生しているハナシノブと交雑していれば純粋な本種の遺伝子が失われていくことになり、遺伝的状況を把握することが急務となっている。そこで筆者は、ハナシノブの種保全を目的としてハナシノブ属の5種について、分子生物学的手法を用いた遺伝子レベルでの基礎的データの収集を行うことにした。2研究方法実験材料は、ハナシノブ275個体(7ヶ所の自生地から)、エゾハナシノブ15個体、カラフトハナシノブ5個体、クシロハナシノブ5個体、セイヨウハナシノブ6個体、人口交配種48個体の合計354個体を用いた。実験方法は、核DNAを用いたRAPD分析およびITS領域によるPCR-RFLP分析を行った。3研究成果平成19年度は、これまでの成果を基に新たに275個体のハナシノブを採取し、雑種検出の調査を行った。その結果、4カ所の自生地(28個体)から雑種の可能性がある個体を検出した。さらに、検出した個体を用いPCR-RFLP分析を行ったところ、セイヨウハナシノブに特異的に出現するDNAバンがみられなかったことからセイヨウハナシノブによる交雑は低いと思われた。次に、雑種の可能性がある3個体を含めたRAPD分析(50種のRAPDプライマーを用い108種のRAPDマーカーを検出)では、系統樹の作成および遺伝的距離の算出を行った。その結果、遺伝的距離が8.6付近でそれぞれの種および雑種の可能性がある個体を識別することができた。今回の成果を基に平成20年3月18日に環境省九州地方環境事務所、野生生物課と今後の取り組みについての協議を行った。

1. Purpose of the study: Native species of Japan, rare plants of Japanese wildlife and precious plants of Aso region In recent years, this species has been rapidly decreasing. In the ninth year of Pingcheng, it has become the most dangerous species and has become the most endangered species. The main cause of reduction is the reduction of the wilderness and the excavation of the most important factors. In the 10th year of Heisei, the Chinese government began to criticize the relationship between the two countries. In addition, it is necessary to ensure that the genetic status of this species is maintained and that the genetic status of this species is maintained. For the purpose of species preservation, the author uses molecular biological methods to collect the five species of the genus 2. Methods: 354 individuals were used in total, including 275 individuals (7 from the original site), 15 individuals, 5 individuals, 6 individuals, and 48 individuals of mating species. Methods: RAPD analysis and PCR-RFLP analysis of nuclear DNA 3 Research results In 2019, based on these results, a new survey of 275 individuals was conducted and various surveys were conducted. The results of the four tests were self-generated (28 individuals) and the probability of the test was determined. In addition, PCR-RFLP analysis was used to detect the presence of specific DNA fragments. RAPD analysis (50 species of RAPD were used, 108 species of RAPD were used) was performed to calculate the distance between the two species. The distance between the results and the results is 8.6. The probability of identification of the species is 8.6. This year's achievements were based on the agreement between Kyushu Local Environmental Affairs Office and Wildlife Division of Ministry of Environment on March 18, 2010.