プリミドンの活性代謝物生成に関わる薬物代謝酵素の活性に基づく薬効個人差の予測

【研究目的】プリミドン(PRM)は本態性振戦等によく使用される抗てんかん薬であり、TDMの対象薬として保険適応が認められている。PRMは投与後に活性代謝物であるフェノバルビタール(PB)およびフェニルエチルマロンアミド(PEMA)に代謝されることが知られているが、PRMの代謝に関しては、in vivo、 in vitro研究から、CYP2C19あるいはCYP3A4の関与が示唆されているものの、PRMからPBあるいはPEMAへの代謝に関わる酵素をin vitro実験系により直接同定した研究は現在までに報告されていない。本研究では、PRMのPBおよびPEMAへの代謝に関与する代謝酵素を同定することを目的として検討を行った。【研究方法】ヒトおよびラット肝ミクロソーム(0.5mg/mL、あるいは2mg/mL)を用い、PRM濃度は0.2mMおよび1mMとし、ヒト血清アルブミン0.1%を添加して代謝反応を行った。反応時間は代謝物を検出しやすくするため、2時間とした。反応終了後、アセトニトリルで除タンパクを行った後、LC-MS/MSを用いてPRMおよび代謝物であるPBの測定を行った。【研究成果】LC-MS/MSによる分析の結果、上記の代謝条件ではPRMの減少は認められなかった。通常ヒトよりも高活性と考えられるラット肝ミクロソームを2mg/mLと高濃度で添加した場合においても代謝が認められないことから、PRMそのものはCYPによる代謝を受けないことが示唆された。過去のCYP3A4やCYP2C19の関与を示唆するデータも考慮すると、PRMそのものはCYP以外の酵素により代謝されPBあるいはPEMAがCYPの基質となっている可能性も考えられる。現在は、サイトゾール系酵素の関与の検証を行うため、初代培養肝細胞を用いた代謝実験を検討中である。代謝酵素の同定には至らなかったが、本研究で得られた結果は、PRMの薬物代謝を議論する上で極めて重要なものと考えられる。

【研究目的】プリミドン(PRM)は本態性振戦等によく使用される抗てんかん薬であり、TDMの対象薬として保険適応が認められている。PRMは投与後に活性代謝物であるフェノバルビタール(PB)およびフェニルエチルマロンアミド(PEMA)に代謝されることが知られているが、PRMの代謝に関しては、in vivo、 in vitro研究から、CYP2C19あるいはCYP3A4の関与が示唆されているものの、PRMからPBあるいはPEMAへの代謝に関わる酵素をin vitro実験系により直接同定した研究は現在までに報告されていない。本研究では、PRMのPBおよびPEMAへの代謝に関与する代謝酵素を同定することを目的として検討を行った。【研究方法】ヒトおよびラット肝ミクロソーム(0.5mg/mL、あるいは2mg/mL)を用い、PRM濃度は0.2mMおよび1mMとし、ヒト血清アルブミン0.1%を添加して代謝反応を行った。反応時間は代謝物を検出しやすくするため、2時間とした。反応終了後、アセトニトリルで除タンパクを行った後、LC-MS/MSを用いてPRMおよび代謝物であるPBの測定を行った。【研究成果】LC-MS/MSによる分析の結果、上記の代謝条件ではPRMの減少は認められなかった。通常ヒトよりも高活性と考えられるラット肝ミクロソームを2mg/mLと高濃度で添加した場合においても代謝が認められないことから、PRMそのものはCYPによる代謝を受けないことが示唆された。過去のCYP3A4やCYP2C19の関与を示唆するデータも考慮すると、PRMそのものはCYP以外の酵素により代謝されPBあるいはPEMAがCYPの基質となっている可能性も考えられる。現在は、サイトゾール系酵素の関与の検証を行うため、初代培養肝細胞を用いた代謝実験を検討中である。代謝酵素の同定には至らなかったが、本研究で得られた結果は、PRMの薬物代謝を議論する上で極めて重要なものと考えられる。