大麻の乱用拡大防止に資するための、尿中大麻代謝物の迅速高感度分析システムの確立

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研究目的尿中大麻代謝物の分析については、尿試料の加水分解操作が必要なこと、抽出操作が繁雑なこと、対象成分の排泄濃度が低く、試料の精製が必要なこと、および、二段階の誘導体化が望ましいとされることが、分析の自動化のネックになって来た。本研究では、これらの解決策として、下記5点の検討を行った。研究方法1. 主なイムノアッセイ試薬キットを取り寄せ、信頼性の高いスクリーニング法を確立すべく検討を実施した。2. 抱合体の加水分解条件を検討し、簡便、迅速かつ自動化が可能な方法として最適化した。3. 大麻代謝物の抽出および精製法について、簡便、迅速、高回収率、かつ自動化可能な方法を検討した。4. 当所で開発、所有している尿中覚せい剤前処理装置にハード面(pHセンサー、エマルションセンサー等)の改造およびソフト面の改良を加え、上記2.および3.の操作の可能な限りの自動化を行った。5. 新規に開発されたものを含め誘導体化剤の検討を行い、大麻代謝物に最適な誘導体化法の検討を行った。特に、オンカラム誘導体化の適用に重点を置き、自動誘導体化ガスクロマトグラフィー質量分析法としての確立を目指した。研究の成果1. 尿中大麻代謝物のイムノアッセイとしては、EMITカンナビノイドアッセイ試薬のカットオフ値50ng/mg用が、感度と信頼性のバランスが最も良く、かつ判定量的なスクリーニング結果が得られ、最適と認められた。2. 抱合体の加水分解は、塩酸酸性条件下で行うのが一般的であったが、酢酸酸性でも十分迅速に加水分解が行え、かつ、自動分析装置の防錆およびpH調整において有利であることが判明した。3. 大麻代謝物の抽出および精製について最適化を行った。4. 当所で所有している尿中覚せい剤前処理装置にハード面(エマルションセンサー等)の改造および自動処理プログラムを作成し、上記操作の自動化を達成した。所要処理時間は尿試料1検体当り約30分であった。5. 大麻代謝物に最適な誘導体化法の検討を行った。特に、オンカラム誘導体化の適用に重点を置いたが、現時点での自動誘導体化の誘導体化収率は25%と十分な結果は得られておらず、今後の検討が必要である。