大麻の乱用拡大防止に資する、尿及び血中大麻代謝物の迅速高感度分析システムの確立

建立尿液和血液中大麻代谢物快速、高灵敏度分析系统，帮助防止大麻滥用蔓延

• 批准号: 21929014
• 负责人: 三木 昭宏
• 金额: $ 0.24万
• 依托单位: 大阪府警察本部 科学捜査研究所
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21929014/
• 关键词: 大麻; 代謝物; 自動分析

本研究は、尿及び血中大麻代謝物の自動分析システムの構築を目的とした。1.試料の前処理については、以前開発した自動前処理装置にハード及びソフトの改良を加え、自動処理に適した代謝物抱合体の加水分解条件、抽出及び精製法を検討し、尿検体のGC-MS分析用試料の調製について、完全な自動化を達成した。2.従来適当なスクリーニング法のなかった血中大麻代謝物については、検出感度の高い唾液用イムノアッセイキットを用いる手法を開発した。全血試料についても、酵素加水分解後、4倍量のメタノールを加え、遠心、除タンパク処理した上清を蒸発乾固し、緩衝液を加えて再溶解し、イムノアッセイを適用することにより、10ng/mL程度の良好な感度でのスクリーニングが可能であった。しかし、その特異性については、入手可能な血液検体数が限定される等のため十分な評価には至らず、今後も検討を継続し、信頼性の高い方法として確立する必要がある。3.上記2.の血液試料の前処理法は、高感度で特異性の高い分析法であるLC-MSに良好に適用可能であった。固相抽出用の陽イオン交換樹脂を妨害成分のスカベンジャーとして利用することにより、試料調製の簡略化も可能であった。4.オンカラム誘導体化剤として使用可能な各種TMS誘導体化剤を用い、大麻代謝物の自動誘導体化GC-MS法を検討した。誘導体化剤としては、BSTFAが比較的良好な成績を示したが、誘導体化収率は50%程度に止まり、定量分析への適用には不十分であった。5.血液および尿中の大麻代謝物の試験にあっては、受動喫煙による陽性反応の排除に特段の配意を要する。ところが、大麻摂取を裏付けるための尿鑑定のカットオフ値は、国または機関により異なった値(10、25、50ng/mL等)が採られている。当所に鑑定嘱託された尿検体中の大麻代謝物濃度を、本研究により開発した方法により分析したところ、50～250ng/mLの範囲が多く、従って、カットオフ値としては50ng/mLが適当と考えられた。

The aim of this study was to construct an automated system for the analysis of cannabis metabolites in urine and blood. 1. Sample preparation, development of automatic pre-processing equipment, improvement of equipment and software, automatic processing, investigation of hydrolysis conditions, extraction and purification methods for metabolite aggregates, preparation of samples for GC-MS analysis of urine samples, complete automation. 2. To develop appropriate methods for detecting blood cannabis metabolites, to detect high levels of sensitivity, and to use appropriate methods for detecting blood cannabis metabolites. The whole blood sample is dissolved in water, the enzyme is decomposed in water, 4 times the amount of the sample is added, the sample is removed, the supernatant is evaporated, the buffer is added, the sample is dissolved again, and the sensitivity is good at 10ng/mL. The specificity of the method is not limited to the number of blood samples that can be obtained, and the reliability of the method is not limited to the number of blood samples that can be obtained. 3. Note 2. The blood sample pretreatment method is highly sensitive and specific. The LC-MS method is well applicable. The cation exchange resin used for solid phase extraction can be used to simplify the preparation of samples. 4. The use of various TMS inducers and the automatic induction of cannabis metabolites by GC-MS were investigated. BSTFA has good results in comparison with other methods, and the ratio of BSTFA to BSTFA is less than 50%. 5. Test for Hemp Metabolite in Blood and Urine, and Specific Matching of Positive Reactions in Response to Smoking The value of urine identification is different (10, 25, 50ng/mL). When the concentration of cannabis metabolites in urine was determined, the analytical method was developed and the range of 50 ng/mL to 250 ng/mL was determined.

项目成果

シンポジウム法科学鑑定と証人尋問-規制薬物鑑定-

研讨会法医学鉴定与证人讯问-受控毒品鉴定-

• 发表时间: 2009
• 作者: 表美香;朝倉英策;和田隆志;表美香;三木昭宏
• 通讯作者: 三木昭宏