プロテインチップシステムによる臓器移植後の免疫抑制剤楽効モニタリング法の開発

开发使用蛋白质芯片系统监测器官移植后免疫抑制剂有效性的方法

• 批准号: 19923075
• 负责人: 山吉 康子
• 金额: $ 0.49万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19923075/
• 关键词: プロテインチップ; 臓器移植; バイオマーカー

【目的】現在、小腸移植後の急性拒絶反応を予測するための臨床上有用なバイオマーカーはほとんど存在しない。われわれは、プロテインチップシステム(SELDI-TOF/MS)を用いて小腸移植後の急性拒絶反応および免疫抑制剤の薬効を反映するバイオマーカーの開発を試みた。【方法】ラット小腸移植モデル(sham群,非拒絶群,拒絶群,免疫抑制剤投与群)を作製し、移植後の経日的な血漿中タンパク質の発現パターンをプロテインチップシステムによって比較した。バイオマーカー候補タンパク質については精製・濃縮後、MALDI-MS/MSによって同定した。さらにプロテインチップを用いて、生体部分小腸移植症例における血清中および腸液中のバイオマーカー候補タンパク質の発現変動を経日的にモニタリングした。【結果】ラット小腸移植モデルの拒絶群において特徴的に上昇する3種類のバイオマーカー候補タンパク質(10.1,13.0,14.8kDa)を見出した。これらのタンパク質を同定した結果、それぞれMigration inhlbitory factor-related protein(MRP)-8,MRP-14およびリゾチームであった。これらのタンパク質はヒト血清および腸液中において、それぞれ10.8,13.2,14.7kDaのピークとしてプロテインチップで同時に検出することができた。次に、当院にて施行された2例の生体部分小腸移植症例においてこれらのバイオマーカーについてモニタリングを行った結果、免疫抑制効果が十分である非拒絶時にはいずれのバイオマーカー候補タンパク質も顕著な発現変動を示さないことが確認できた。現在までに2症例とも拒絶反応は認められていないことから、拒絶時のバイオマーカーの変動についてはさらなる検討が必要である。プロテインチップシステムを用いたバイオマーカーモニタリングは従来のELISA法に比べて迅速な診断が可能であることから、今後臨床検査への応用が期待できる。

Objective: To predict acute rejection after small bowel transplantation and to evaluate its clinical utility. SELDI-TOF/MS is used to test the development of acute rejection response and immunosuppressive agents after small bowel transplantation. [Methods] Small bowel transplantation (sham group, non-rejection group, rejection group, immunosuppressive agent group) was performed and plasma quality development was compared on the day after transplantation. MALDI-MS/MS is the same as MALDI-MS. In the case of partial small bowel transplantation, the serum and intestinal fluid of the patient are the candidates for the development of the disease. [Results] Three kinds of candidate proteins (10.1, 13.0, 14.8 kDa) were found in the increase of rejection characteristics of small intestine transplantation. The results of this study are: Migration inhlbitory factor-related protein(MRP)-8, MRP-14 and migration in the same way. The protein was found in the serum and intestinal fluid at 10.8, 13.2, and 14.7 kDa. In addition, two cases of partial small bowel transplantation were performed in our hospital. The results showed that immunosuppression was very effective. When it was not rejected, it was confirmed that the candidate for partial small bowel transplantation was active. Now, there are two cases: refusal to accept, refusal to accept. It is possible to diagnose the disease more quickly than ELISA, and it is expected to be used in clinical investigation in the future.