上水(飲料水)中のNod1刺激因子とヘリコバクター感染慢性胃炎との関連の調査研究
自来水(饮用水)中Nod1刺激因子与幽门螺杆菌感染慢性胃炎的关系研究
基本信息
- 批准号:19927016
- 负责人:
- 金额:$ 0.49万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
- 财政年份:2007
- 资助国家:日本
- 起止时间:2007 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
胃粘膜のヘリコバクター・ピロリ菌感染によるNod蛋白質の発現とNF-κB活性化の状態を調べるため。胃内視鏡検査で採取されて病理検査に提出され、ヘリコバクター・ピロリ菌の検査がされた検体の免疫染色を、抗ヒトNod1抗体(Cellsignaling Technology)、抗ヒトNod2抗体(Cayman Chemical)、抗ヒトリン酸化NF-κB抗体を(Cellsignaling Technology)を用いて染色しました。Nod1抗体は組織染色性が悪く、私たちの手では発現の同定が困難でしたが、これまでの報告から胃粘膜上皮に恒常的に発現していることが示唆されました。また同部位でNF-κBの活性化が見られました。このことから、ヘリコバクター・ピロリ菌が感染するとNF-κBが活性化されるらしいことがわかりました。そこで、AGSという胃癌の細胞株を使って、ヘリコバクター・ピロリ菌の菌量とNF-κBの活性化を解析したところ相関が見られました。次に、このシグナルNod1やその下流の分子を使って伝達される過程を調べて、Nod1活性化リガンドの定量系を作るため、SiRNA産生ベクターをトランスフェクトした細胞株を作ろうとしましたが、Nod1や下流のカスパーゼを十分にノックダウンすることができませんでした。そこで、従来からの過剰発現による方法で、凍結乾燥により濃縮した飲料水のNod1リガンドの定量をしました。これらの成果は来年度の臨床検査学会で発表する予定です。
研究胃粘膜中幽门螺杆菌感染的NOD蛋白表达和NF-κB激活的状态。使用抗人类NOD1抗体,抗人类NOD2抗体(Cayman Chemical)和抗人类磷酸化的NF-κB抗体(Cellibody(Cellibody)(Cellibody)(Cellibody(Celligody)(Celligody)(Celligody),对通过胃镜收集并提交病理检查并进行病理检查并进行病理检查的标本免疫染色。尽管NOD1抗体的组织染色较差,并且很难使用我们的手识别其表达,但先前的报道表明,它在胃粘膜上皮上是组成型表达。另外,在同一部位观察到NF-κB激活。这表明幽门螺杆菌的感染似乎激活了NF-κB。因此,我们使用称为AGS的胃癌细胞系分析了幽门螺杆菌幽门螺杆菌的量和NF-κB的激活,并发现了相关性。接下来,我们研究了传输该信号NOD1及其下游分子的过程,为了创建用于NOD1激活的配体的定量系统,我们试图创建一个用产生siRNA的载体转染的细胞系,但无法充分地击倒NOD1和下游caspase。因此,我们通过使用常规的过表达方法冷冻干燥,在浓缩饮用水中定量NOD1配体。这些结果将于明年在临床实验室协会中提出。
项目成果
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