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インフルエンザのワクチン製造に有用な新しいウイルス簡易濃縮精製技術の確立

建立适用于流感疫苗生产的新型病毒简单浓缩和纯化技术

基本信息

批准号：
20925014
负责人：
尾崎晃一
金额：
$ 0.37万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20925014/
关键词：
インフルエンザウイルス精製ワクチン

项目摘要

近年、高病原性鳥インフルエンザウイルスのヒトへの感染が起こり、インフルエンザパンデミックの発生が危惧されている。インフルエンザの予防にはワクチンが有効である。ワクチン製造には複雑な工程により純度の高いウイルス粒子を精製する必要がある。新型インフルエンザウイルスに備えて迅速かつ簡便に大量の精製ウイルス粒子を準備することが重要である。インフルエンザウイルスは硫酸化セルロースに吸着することが知られており、本研究ではこれを利用した濃縮精製技術の確立を目的とした。硫酸化セルロースはチッソ(株)のセルファインサルフェイトを用いた。これはセルロースビーズ表面に硫酸エステルを結合させたもので、1mlのカラムに詰めたものを使用した。濃縮精製の手順は1)ウイルスの吸着、2)バッファによる洗浄、3)バッファによるウイルスの溶出・回収、の3段階からなる。濃縮精製の評価はHA価およびタンパク量で行った。セルファインサルフェイト表面の硫酸エステル含有量や、溶出バッファの塩濃度について比較検討を行い、最適条件を決定した。走査型電子顕微鏡による表面観察や、溶出物のSDS-PAGE像からもウイルスが濃縮精製されているであろうことが確認できた。インフルエンザAウイルスの異なる4つの型(H1N1、H3N2、H5N1、H7N7)およびインフルエンザBウイルスについて検討を行い、回収率に差はあるものの、ウイルスの型に依らず濃縮精製が行えることがわかった。本研究の結果として、本方法によるインフルエンザウイルスの濃縮精製はそのままヒト用インフルエンザワクチンとして使用できる純度には達していないが、動物用インフルエンザワクチンとして、またはヒト用インフルエンザワクチンの予備精製として使用することで、準備するウイルス量の削減および精製時間の短縮に役立つと考えられる。

In recent years, the infection of highly pathogenic avian influenza virus has become a serious problem. The answer is yes. It is necessary to refine the particles of high purity in the production process. The preparation of new types of particles is very important because it is quick and easy to refine them. The aim of this study is to establish a new technology for the purification of sulfuric acid. The sulfur compound is used in the production of sulfur compounds. The surface of the sulfur acid is mixed with the surface of the sulfur acid, and the surface of the sulfur acid is mixed with the surface of the sulfur acid. The concentration and purification procedures include 1) adsorption, 2) washing, 3) dissolution and recovery, and 3-stage separation. The concentration and purification of HA are evaluated according to the quantity of HA. The content of sulfuric acid on the surface of the solution, the concentration of sulfuric acid dissolved in the solution, and the optimum conditions were determined. SDS-PAGE image of dissolved substance was obtained by scanning electron microscope, and the concentration and purification of dissolved substance were confirmed. 4 types (H1N1, H3N2, H5N1, H7N7) are different from each other, and the recovery rate is different from each other. As a result of this study, the purity of the concentrate and purification of the product for animal use and preparation of the product for animal use was achieved by this method. The preparation of the product is to reduce the quantity of the product and shorten the refining time.