メトトレキサートの薬効・毒性に関わるペプチダーゼの酵素活性と遺伝子多型の関連

【目的】小児の急性リンパ性白血病(ALL)患者に対するメトトレキサート(MTX)を用いた化学療法において,治療効果と毒性発現には患者間で個体差が生じる.その要因として,細胞内への長鎖のMTXポリグルタメート体(MTXPG)蓄積の増大が考えられ,それは加水分解酵素であるγ-glutamyl hydrolase(GGH)の活性低下によって引き起こされることが報告されている.GGH活性にはGGH遺伝子の一塩基多型(SNPs)が関与することが報告されでいるが,日本人における検討は十分に行われていない.本研究では,日本人におけるGGH活性とSNPsの関連について明らかにすることを目的とした.【方法】本研究では,GGHのmRNA発現量やGGH酵素活性に影響を与えることが報告された3箇所のSNPs(-401C>T,-354G>T,452C>T)について,日本人における発現頻度を調査した.遺伝子多型解析はボランティア18名から得られた血液からDNAを抽出し,PCR-RFLP法またはダイレクトシーケンス法を用い,変異の有無を確認した.【結果・考察】その結果,それぞれの遺伝子型の頻度は,-401C>TはC/Cが61%,C/Tが11%,T/Tが28%,-354G>TはG/Gが72%,G/Tが28%,452C>TはC/Cが89%,C/Tが11%であった.今回調査したサンプルにおいて,-354G>Tおよび452C>Tの2箇所の変異の頻度はすでに報告されている欧米人の頻度よりも低く,民族間でアレル頻度に差が見られることが示唆された.また,-401C>Tでは約30%にホモの変異が検出されたことから,GGH酵素活性に影響がある変異の頻度は日本人で高い可能性が示唆された.今後,GGH遺伝子のエピジェネティクス研究も加え,MTXの個別化治療への応用の可能性を検討することが必要であると考える.

【目的】小児の急性リンパ性白血病(ALL)患者に対するメトトレキサート(MTX)を用いた化学療法において,治療効果と毒性発現には患者間で個体差が生じる.その要因として,細胞内への長鎖のMTXポリグルタメート体(MTXPG)蓄積の増大が考えられ,それは加水分解酵素であるγ-glutamyl hydrolase(GGH)の活性低下によって引き起こされることが報告されている.GGH活性にはGGH遺伝子の一塩基多型(SNPs)が関与することが報告されでいるが,日本人における検討は十分に行われていない.本研究では,日本人におけるGGH活性とSNPsの関連について明らかにすることを目的とした.【方法】本研究では,GGHのmRNA発現量やGGH酵素活性に影響を与えることが報告された3箇所のSNPs(-401C>T,-354G>T,452C>T)について,日本人における発現頻度を調査した.遺伝子多型解析はボランティア18名から得られた血液からDNAを抽出し,PCR-RFLP法またはダイレクトシーケンス法を用い,変異の有無を確認した.【結果・考察】その結果,それぞれの遺伝子型の頻度は,-401C>TはC/Cが61%,C/Tが11%,T/Tが28%,-354G>TはG/Gが72%,G/Tが28%,452C>TはC/Cが89%,C/Tが11%であった.今回調査したサンプルにおいて,-354G>Tおよび452C>Tの2箇所の変異の頻度はすでに報告されている欧米人の頻度よりも低く,民族間でアレル頻度に差が見られることが示唆された.また,-401C>Tでは約30%にホモの変異が検出されたことから,GGH酵素活性に影響がある変異の頻度は日本人で高い可能性が示唆された.今後,GGH遺伝子のエピジェネティクス研究も加え,MTXの個別化治療への応用の可能性を検討することが必要であると考える.