メトトレキサートの薬効・毒性に関わるペプチダーゼの酵素活性と遺伝子多型の関連

甲氨蝶呤药效及毒性相关肽酶活性与基因多态性的关系

• 批准号: 20927005
• 负责人: 原 ゆかり
• 金额: $ 0.54万
• 依托单位: Shimane University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20927005/
• 关键词: メソトレキサート; 遺伝子多型; GGH

【目的】小児の急性リンパ性白血病(ALL)患者に対するメトトレキサート(MTX)を用いた化学療法において,治療効果と毒性発現には患者間で個体差が生じる.その要因として,細胞内への長鎖のMTXポリグルタメート体(MTXPG)蓄積の増大が考えられ,それは加水分解酵素であるγ-glutamyl hydrolase(GGH)の活性低下によって引き起こされることが報告されている.GGH活性にはGGH遺伝子の一塩基多型(SNPs)が関与することが報告されでいるが,日本人における検討は十分に行われていない.本研究では,日本人におけるGGH活性とSNPsの関連について明らかにすることを目的とした.【方法】本研究では,GGHのmRNA発現量やGGH酵素活性に影響を与えることが報告された3箇所のSNPs(-401C>T,-354G>T,452C>T)について,日本人における発現頻度を調査した.遺伝子多型解析はボランティア18名から得られた血液からDNAを抽出し,PCR-RFLP法またはダイレクトシーケンス法を用い,変異の有無を確認した.【結果・考察】その結果,それぞれの遺伝子型の頻度は,-401C>TはC/Cが61%,C/Tが11%,T/Tが28%,-354G>TはG/Gが72%,G/Tが28%,452C>TはC/Cが89%,C/Tが11%であった.今回調査したサンプルにおいて,-354G>Tおよび452C>Tの2箇所の変異の頻度はすでに報告されている欧米人の頻度よりも低く,民族間でアレル頻度に差が見られることが示唆された.また,-401C>Tでは約30%にホモの変異が検出されたことから,GGH酵素活性に影響がある変異の頻度は日本人で高い可能性が示唆された.今後,GGH遺伝子のエピジェネティクス研究も加え,MTXの個別化治療への応用の可能性を検討することが必要であると考える.

Objective: To investigate the effect of MTX chemotherapy on acute leukemia (ALL) in children. The main reason for this is the increase in MTXPG accumulation in cells, including the decrease in activity of γ-glutamyl hydrolase(GGH), a hydrolytic enzyme, and the increase in SNPs associated with GGH. The purpose of this study is to investigate the relationship between GGH activity and SNPs in Japanese. [Methods] In this study, three SNPs(-401C>T,-354G>T, and 452C>T) were reported, and the frequency of GGH mRNA expression and GGH enzyme activity was investigated in Japanese. DNA polymorphism analysis was performed on 18 samples obtained from blood samples. PCR-RFLP method was used to confirm the presence or absence of different DNA types. The results showed that the frequencies of the three types of the genetic inheritance were: -401 C>T C/C 61%, C/T 11%, T/T 28%,-354 G>T G/G 72%, G/T 28%, 452 C>T C/C 89%, C/T 11%. The frequency of the two places where the correction is made is reported to be low, and the frequency of the loss is reported to be low among ethnic groups. The activity of GGH enzyme is affected by the frequency of variation in Japanese. In the future,GGH gene development research will be carried out, and the possibility of MTX individualized therapy will be discussed.