腸内細菌科におけるqnrと基質特異性拡張型β-ラクタマーゼ遺伝子の関連

肠杆菌科QNR与超广谱β-内酰胺酶基因的关系

• 批准号: 20930009
• 负责人: 齋藤 良一
• 金额: $ 0.25万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20930009/
• 关键词: 基質特異性拡張型β-ラクタマーゼ; プラスミド性キノロン耐性遺伝子; キノロン系薬耐性

近年、腸内細菌科の菌の接合伝達性プラスミド上に、キノロン系薬によるDNA gyrase阻害を抑制しうる蛋白質をコードする遺伝子(キノロン耐性遺伝子:qnr)が存在し、それを保有するプラスミドは基質特異性拡張型β-ラクタマーゼ(ESBL)遺伝子を保有すること、及びインテグロン全体がトランスポゾン様構造を持つことが報告されている。本研究では、2005年11月から2006年10月に東大病院にて臨床分離され、薬剤感受性試験にてESBL産生菌と確認されたEscherichia coli(n=46)及びKlebsiella oxytoca(n=27)を用い、qnr遺伝子保有率を調査した。ESBL及びqnr遺伝子はPCR法にて検出し、陽性サンプルはダイレクトシーケンス法にて塩基配列を決定した。また、RFP耐性E coliをレシピエントとした伝達試験を行い、キノロン系薬及びβ-ラクタム系薬以外の交差薬剤耐性の割合を解析した。最後に、qnr遺伝子が存在するプラスミドを抽出し、PCR〓appingにてインテグロン構造を決定した。ESBL遺伝子型は、E.coliの23株(71.7%)、K.oxytocaの全株(100%:その中で48%はSHV型とCTX-M型の両方を保有)でCTX-M型が認められた。qnr遺伝子はE.coliの3株(6.5%)、K.oxytocaの5株(18.5%)で認められ、全てがqnrAlであった。伝達試験において6株(E.coli:3株、K.oxytoca:3株)のqurAl陽性トランスコンジュガントが得られ、全ての株においてキノロン系薬、β-ラクタム系薬及びアミノグリコシド系薬の耐性が認められた。それらのqnrAlが存在するプラスミドは、約140kbのclass 1インテグロン構造を有するものであった。qnrAl陽性K.oxytocaの1株において、aac(6')-IIc-aadA2を有する珍しいclass 1インテグロンが認められた。qnr遺伝子のみでは臨床上キノロン系薬剤耐性を示さないが、それを保有するプラスミドはインテグロン構造を有すること、qnr遺伝子陽性ESBL産生菌においては、キノロン系薬とβ-ラクタム系薬以外にもアミノグリコシド系薬の耐性を同時に伝播することが確認されたため、多剤耐性化のリスク要因として監視する必要があると考えられた。

In recent years, it has been reported that there exist and maintain protein resistance genes (qnr) for conjugal resistance of enterobacteriaceae bacteria, and that there are also reports of the existence and maintenance of matrix specific β-catenin (ESBL) genes, and the structural maintenance of all conjugal resistance genes. In this study, we investigated the percentage of ESBL producers identified by clinical isolation and susceptibility tests at Tokyo University Hospital from November 2005 to October 2006, including Escherichia coli (n = 46) and Klebsiella oxytoca (n = 27). ESBL and qnr genes were detected by PCR, and the gene sequence was determined by PCR. RFP resistance to E. coli is determined by the analysis of cross resistance to E. coli in the middle of the experiment, in the experiment, in the experiment, in Finally, qnr gene expression is determined by PCR amplification. ESBL, E. coli 23 strains (71.7%), K. oxytoca 100%, SHV 48%, CTX-M 100%, CTX-M 100%. 3 strains of E. coli (6.5%) and 5 strains of K. oxytoca (18.5%) were identified as qnrAl. 6 strains (E. coli: 3 strains, K. oxytoca: 3 strains) of qurAl positive gene were isolated and all the strains were isolated from QurAl positive gene system, β-gene system and QurAl positive gene system. The qnrAl is available in the database, about 140kb in class 1, and the database is available in the database. QnrAl positive K. oxytoca 1 strain, aac (6')-IIc-aadA2, has a class 1 gene. qnr gene expression is clinically important for the development and maintenance of ESBL gene structure. qnr gene expression is important for the development and maintenance of ESBL gene structure. qnr gene expression is important for the development and maintenance of ESBL gene.