微妙な酸性度の違いで細胞の種類を簡単に識別する色素の開発

开发可根据酸度的细微差异轻松识别细胞类型的染料

• 批准号: 23915014
• 负责人: 徳永 恵津子
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: Nagoya Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23915014/
• 关键词: フタロシアニン; がん細胞; フッ素

機能性色素であるフタロシアニンを用いて細胞の微小なpH変化を色や吸収波長の違いによって瞬時に判断する色素を開発することとした。フタロシアニン環には環の内側に4つ,外側に4つの窒素原子がり,内側の4つは金属に配位している。そのため外側の4つの窒素を高感度弱塩基として利用することを考えた。すなわち,フタロシアニン核のペリ位に数多くのフッ素,特にトリフルオロエトキシ基を導入することによって,フタロシアニン核内部を電子欠乏状態にすれば,窒素の塩基性度は極めて低下するため,超弱塩基として機能するはずである。そこで,1,4-トリフルオロエトキシフタロニトリルを出発原料に用いて,塩化亜鉛および塩基の存在下,加熱環流したところ,目的のαトリフルオロエトキシ置換型フタロシアニンが収率よく得られた。この色素は緑色であった。次にこの色素をクロロホルム溶液にし,紫外線吸収スペクトルを測定したところ,濃度を薄めていくと吸収スペクトルが大きく変化することを見いだした。これは,クロロホルム中のごく微量の酸を検知したためであると考え,ピリジンを1滴添加するとスペクトルは濃度の濃い状態と同じ紫外線吸収スペクトルを示した。一方,濃度の濃い状態のものにトリフルオロ酢酸を1滴添加したところ,今度は希釈した状態と同じ紫外線吸収スペクトルを示した。これらの結果は,希釈するという,ごく微量の酸の存在によって紫外吸収スベクトルが著しく変化したことを意味している。この知見を利用し,がん細胞を用いて実験を行った。即ちH929を適当量とり,PBSで洗浄後,PBS1mlに浮遊させ,フタロシアニンを5μ添加した。コントロールとして、PBSのみと比較した。しかし,細胞添加の方が,少し色がつく程度であった。続いてK562細胞にフタロシアニン10μlを添加した。また,細胞を溶解させるために界面活性剤を10μlを添加した。その結果,細胞のみは,標準よりも強い青色を示すことがわかった。

Functional pigments are used to detect changes in the pH of cells and to detect changes in the pH of cells. The ring has four atoms on the inside, four atoms on the outside, and four metal atoms on the inside. The outer side of the four elements are highly sensitive and weak. The number of elements in the nucleus is very high, especially the number of elements in the nucleus is very low. In the presence of the 1,4-triphenyl group, the heating current of the raw material is heated, and the target α-triphenyl group is replaced by the substitutional group. The pigment is green. For the second time, the pigment solution was determined by UV absorption, and the concentration was determined by UV absorption. In this case, the concentration of trace acid in the solution is determined by the concentration of trace acid in the solution. In addition, the concentration of the acid in the medium state is higher than that in the medium state, and the ultraviolet absorption is higher than that in the medium state. As a result, the presence of trace amounts of acid is expected to increase the absorption of ultraviolet light. This knowledge is used in the cell. That is, H929 is added in an appropriate amount,PBS is washed,PBS1ml is added, and the pH value is 5μ. The game is over. The cells add to the recipe, and the color decreases to a certain degree. Add 10μl to the K562 cells. Cell lysis and interfacial activity 10μl. The result is that the cells are not normal, and the cells are not normal.