色素性乾皮症の迅速相補群診断法

着色性干皮病的快速互补组诊断方法

• 批准号: 23931004
• 负责人: 黄倉 真恵
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23931004/
• 关键词: 色素性乾皮症; アデノウイルス; 紫外線照射

色素性乾皮症(xeroderma pigmentosum:XP)は,皮膚癌を多発する常染色体劣性の先天性疾患で,ヌクレオチド除去修復を欠損するA～G群と損傷乗り越え複製機構に障害のあるバリアント型(XPV)の8つの遺伝的相補性群が知られており、臨床診断と遺伝子診断が迅速に確定されれば,徹底した遮光によって露光部の色素沈着と皮膚癌の発生が抑制できる。本研究は,紫外線感受性試験と組み換えアデノウイルスによって,簡便にXPの相補群を診断する相補群診断システムを確立することを目的とした。まず、7つのXP相補群とバリアント群の蛋白質をそれぞれ発現するアデノウイルスベクターのセットを作製し、RT-PCR法により、それぞれのXP遺伝子発現を確認した。次は各XP相補群患者由来の線維芽細胞に,各群遺伝子発現アデノウイルスを感染させ,紫外線照射後細胞数を計測或はFlow Cytometry法によりアポトシースを解析した。その結果、細胞数計測実験ではA,C,D,F,G,群でそれぞれの発現アデノウイルスにより特異的レスキューされた。Flow Cytometryによる細胞DNA周期解析では細胞計測結果同様、紫外線から生じたアポトシースSub-G1を特異的に減少させることがわかった。特に、今まで乗り越え修復に関わるDNAポリメラーゼイータ遺伝子異常によるバリアント群とXPE群は、他の相補群に比べ、紫外線感受性の検出が困難と言われてきたが、BrdU(bromodeoxyuridine)ELISA法で感度よく検出することができた。以上の結果より、XP発現アデノウイルス感染と紫外線照射により、細胞数計測、BrdU ELISA或いはFlow Cytometry解析法により簡単にXPバリアント群を含む相補群を診断することができ、従来の診断法を代わった診断法として有意な方法と考えた。

Xeroderma pigmentosum (XP) is a congenital disorder with autosomal defects that causes multiple skin cancers. It is characterized by the presence of complementary groups A to G, damage, duplication, and failure of replication mechanisms. Xeroderma pigmentosum (XPV) is a type of Xeroderma pigmentosum (XP). It is characterized by rapid identification of Xeroderma pigmentosum, clinical diagnosis, and differential diagnosis. The purpose of this study is to establish a complementary group diagnostic system that can easily diagnose the complementary groups of XP by using ultraviolet sensitivity tests and diagnostic tools. The protein expression of the 7-protein complement group was confirmed by RT-PCR and the protein expression of the 7-protein complement group was confirmed by RT-PCR. The number of cells after UV irradiation was measured or analyzed by flow cytometry. The results, cell count measurements were A, C, D, F, G, and G, and the results were different from those of A, C, D, F, G. Flow Cytometry: Cell DNA cycle analysis, cell measurement results, UV radiation, and specific reduction. In particular, the Balianent group and the XPE group, which are involved in DNA polymerase gene abnormalities related to DNA repair, are more difficult to detect than other complementary groups. This is why the BrdU (bromodeoxyuridine) ELISA method can be sensitive. The above results are: XP detection, infection, UV irradiation, cell count measurement, BrdU ELISA or flow cytometry analysis, simplified XP detection, and diagnostic methods.

项目成果

Diagnosis of Xeroderma Pigmentosum by Recombinant Adenovirus Infection and Measurement of UV Sensitivity of Patient Fibroblasts

重组腺病毒感染诊断色素性干皮病及患者成纤维细胞紫外线敏感性测定

• 发表时间: 2011
• 作者: Miki Yoshitomo;Hitoshi;Ishibashi;Go;Kato;Kei Eto;Junichi Nabekura;竹田晶子;松本竹久;水野敬子;赤松裕介;池尻誠;池尻誠;Makoto Ikejiri;西塔毅(Saito Takeshi);Erika Ogata;黄倉真恵
• 通讯作者: 黄倉真恵