細胞シート工学を利用した歯髄幹細胞とブタ膵島細胞の共移植

利用细胞片层工程联合移植牙髓干细胞和猪胰岛细胞

• 批准号: 23931047
• 负责人: 大野 慎一郎
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23931047/

膵島細胞移植はI型糖尿病に対する低侵襲医療として世界的に拡がっているが、移植細胞の生着率が低いという問題がある。生着率が低い原因は(1)移植局所の低酸素(2)移植早期グラフト消失Instant blood mediated infilammatory reaction(IBMIR)(3)膵島分離手技による細胞間結合の破壊(4)免疫応答(拒絶、抗ランゲルハンス島抗体、GAD抗体)等、種々ある。また根源に立ち返ってみると、移植部位は門脈内で良いのかという議論もするべきであると考える。今回我々は(1)、(2)に注目した。本研究では移植膵島への早期血管誘導やIBMIRを防止する目的で、細胞工学により作製した歯髄幹細胞シートにブタ膵島細胞をサンドし、薪たな移植先として皮下に移植、その効果を検討する。(1)歯髄幹細胞は国立長寿医療センターの中島教授より頂いた。(2)歯髄幹細胞を温度応答性培地上で特殊な培養液を使用し培養。温度変化を与えることでシートとして回収可能であった。HE染色を行い、細胞が層となりシート化していることを確認した。(3)次にブタ膵島細胞をliberase MTF/CTを使用し、Ricordi変法にて分離。(4)分離した膵島を歯髄幹細胞シート上に播種すると、膵島がシートに接着することを確認した。Viabllityを確認すると、膵島が歯髄細胞内でviableなのが確認できた。今後施行すべき実験はシートの機能評価と実際の移植実験であるが、liberaseMTF/CTが非常に高価で頻回の実験は困難である。ただし、今後は施行する予定であり、vitro、vivoでの機能発現が良好であれば新たな移植法ということで発信できるものと考える。

Cell transplantation is a low invasive treatment for type I diabetes and a problem in the world of cell transplantation. The reasons for the low survival rate are: (1) hypoacidemia in the transplantation bureau;(2) disappearance of Instant blood mediated inflammatory reaction(IBMIR) in the early stage of transplantation;(3) disruption of cell-to-cell binding during isolation of the island;(4) immune response (rejection, anti-inflammatory island antibody, GAD antibody), etc. The root cause of the disease is to be found in the portal vein. Now I'm back to (1) and (2). The aim of this study was to prevent early vascular induction and IBMIR in transplanted islets and to investigate the effects of cellular engineering on the development of stem cells and subcutaneous transplantation. (1)The stem cells are the top of the list for Professor Nakajima of National Longevity Medical Center. (2)The stem cells were cultured in a special culture medium at different temperatures. temperature and humidity HE staining confirmed that the cells were in the middle of the cell cycle. (3)The next step is to isolate cells using the liberase MTF/CT method. (4)The stem cells were isolated from the stem cells. Viablity is recognized as viable in cells. In the future, it will be difficult to implement the function evaluation and actual migration, and liberaseMTF/CT will be very high frequency. In the future, the function of the transplant method will be well performed.