非結核性抗酸菌由来特異糖ペプチド脂質抗原の構造と宿主応答機序に関する研究

非结核分枝杆菌特异性糖肽脂质抗原结构及宿主反应机制研究

基本信息

批准号：
24930029
负责人：
中崇
金额：
$ 0.38万
依托单位：
株式会社MBR
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24930029/
关键词：
抗酸菌 Glycopeptidolipid Mycobacterium avium-intracellulare complex

项目摘要

【研究目的】肺Mycobacterium avium-intracellulare complex (MAC)症は結核に類似した病変を生じ、非結核性抗酸菌症の70-80%を占める重要な呼吸器疾患のひとつである。MAC菌は、菌体総脂質を弱アルカリ加水分解して得られる糖ペプチド脂質抗原(glycopeptidolipid, GPL)の糖鎖構造と血清凝集反応の違いから28種類の血清型に分類され、特定の血清型菌がヒトに対して強い病原性を示し、各血清型GPLと病原性との関連が示唆されている。自然免疫に関わる受容体のひとつであるTo11-like receptor 2 (TLR2)によるGPLの認識には、天然型GPLの糖鎖に付加するアセチル(Ac)基の存在が必須であるが、天然型GPLのAc基の修飾位置やその数、糖鎖構造の相異によるTLR2認識機構の詳細については未解明である。本研究では、宿主応答における天然型GPLの構造活性相関を明らかにすることを目的とした。【研究方法】臨床分離MAC菌Ku11株を絹いて、薄層クロマトグラフィーにより菌体総脂質から天然型GPLを単離精製し、質量分析機器によって構造解析を行った。宿主応答の評価は、ヒトTLR2およびTLR4遺伝子を導入したHEK293細胞を用いて実施した。【研究成果】Ku11は既存血清型にはない六糖からなる新規GPLを有し、糖鎖に結合するAc基の数(1～3個)と結合位置の違いにより、6種の天然型GPLを含有することがわかった。これらの宿主応答は、Ac基が一つ結合したGPLだけがTLR2によって強く認識されることから、Ku11はGPL糖鎖をAc基によって保護し、TLR2の感知から回避している可能性が示唆された。今後、さらに細胞内生存菌の天然型GPLの組成変化を調べることで、免疫回避との関係がより明確になると考えられる。

[研究目的]肺部分枝杆菌菌群结构络合物（MAC）引起类似于结核病的病变，是占非结核分枝杆菌占70-80％的重要呼吸道疾病之一。基于糖基化结构的差异和血清糖基化结构的差异和血清糖基化结构的差异（GPL），通过弱碱性水解对总细胞脂质获得的血清型和血清糖肽（GPL）分为28种类型的血清型，并表明每个血清型的血清型具有强烈的致病性。为了通过TO-11样受体2（TLR2）对GPL的识别（TLR2），其中一种与先天免疫相关的受体，存在于天然GPL的聚糖上附着在自然GPLS的聚糖上的乙酰基（AC）基团，但是TLR2识别识别的细节是由于修饰位置的AC组数量，并且在天然GPLS和Gllycun中的AC组数量均未阐明。这项研究旨在阐明天然GPL在宿主反应中的结构活性关系。 [研究方法]临床分离的MAC菌株KU11是丝绸，并通过薄层色谱分离自然GPL并从细胞的总脂质中纯化，并使用质谱仪进行结构分析。使用用人TLR2和TLR4基因转染的HEK293细胞评估宿主反应。 [研究结果] KU11具有一种新型的GPL，由现有血清型中未发现的六糖组成，发现它包含六个天然GPL，因为AC组数量（1至3）的差异（1至3）与糖链和结合位置结合。这些宿主反应表明，只有一个具有一个AC组结合的GPLS由TLR2强烈识别，这表明KU11保护具有AC基团的GPL糖基团，并避免TLR2传感。人们认为，在细胞内存活细菌中天然GPL组成的变化的进一步研究将使与免疫逃避的关系更加清晰。