細胞内感染における非結核性抗酸菌の特異糖ペプチド脂質抗原の役割解明(2)

阐明非结核分枝杆菌特异性糖肽脂质抗原在细胞内感染中的作用（2）

• 批准号: 15H00598
• 负责人: 中 崇
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: 株式会社MBR
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15H00598/
• 关键词: 抗酸菌; glycopeptidolipid; 肺MAC症

【研究目的】肺MAC症は結核に類似した病変を生じ、非結核性抗酸菌症の重大な呼吸器疾患である。MAC菌は特異糖ペプチド脂質(GPL)抗原によって、28種類の血清型に分類されている。臨床分離株は、特定の血清型菌が強い病原性を示すことから、各血清型GPLと病原性の関連が示唆されているが、詳細な宿主応答機構は解明されていない。これまでに、MAC症臨床分離Kull株の天然型GPL(intact GPL, iGPL)6種のうち、アセチル(Ac)基が一つ付加したmono-Ac iGPLのみが、TLR2に認識されることから、細胞内感染Kull株は、Ac基によってGPL糖鎖を修飾し、TLR2感知から回避している可能性を示唆する知見を得た。さらに本研究では、細胞内感染時におけるiGPLの分子種動態変化を詳細に検証し、細胞内感染におけるMAC菌GPLの役割を解明することを目的とした。【研究方法】マクロファージ系細胞株にKull株を感染させ、経日的に回収した細胞内感染菌から総脂質を抽出し、MALDI/TOF MS分析によって、iGPLの分子種組成変化を解析した。【研究成果】細胞内感染菌では、感染4日後以降にdi-およびtri-Ac iGPLが増加傾向を示し、特にtri-Ac iGPLの増加が顕著であった。さらに感染菌では、構造未知のtri-Ac iGPLが感染後に継続的に増加し、非感染菌ではほとんど検出されない新たなiGPLを合成することが明らかとなった。このことから、細胞内感染菌はiGPLのAc基修飾に加えて、新たなiGPL合成により、iGPL分子種を多様化したことで、TLR2の認識回避を可能にした要因の一つであると考えられる。以上から、さらに天然型GPLのAc基転移酵素遺伝子や感染菌にのみ出現するiGPLの動態変化を追うことで、GPLと免疫回避の関係がより明確になると考えられる。

[objective] the nuclear diagnosis of pulmonary MAC syndrome is similar to that of severe respiratory disease and non-nuclear acidophilia. The serotypes of MAC bacteria were classified according to their specific glucose and lipid (GPL) antigens and 28 serotypes. The isolates were isolated from the bed, the pathogenicity of specific serotypes was strongly confirmed, the pathogenicity of each serotype of GPL was detected, and the host organ of each serotype was used to explain the disease. The isolates of Kull strain GPL (intact GPL, iGPL) were separated from the Kull strain, and the six strains of natural GPL (intact GPL, iGPL) were separated from each other. The patients were infected with Kull strains, Kull strains, Ac strains, GPL glycosaminoglycans, and TLR2 perceptual avoidance assays. The purpose of this study was to detect the molecular dynamics of iGPL during the period of intracellular infection, to detect the molecular weight of E. coli, to detect the intracellular infection of E. coli MAC strain GPL, and to understand the objective of this study. [research methods] the cell strain Kull was infected, the intracellular infective bacteria were isolated, the lipids were extracted, the MALDI/TOF MS analysis was performed, and the molecular composition of iGPL was analyzed. [research results] after 4 days of infection, di- infection and tri-Ac iGPL infection were reported, and special tri-Ac iGPL infection was added. The infectious bacteria, the unknown tri-Ac iGPL, the non-infectious bacteria, the new iGPL, the synthetic bacteria, the unknown bacteria, the infected bacteria and the non-infectious bacteria. Infection of iGPL, Ac of intracellular bacteria, synthesis of new iGPL, multiplication of iGPL molecules, and knowledge avoidance of TLR2 may be due to multiple infections. In the case of natural GPL, Ac-based transferase and sub-infection bacteria, iGPL was found to be dynamic, GPL-based immune avoidance test was clear.