細胞内感染における非結核性抗酸菌の特異糖ペプチド脂質抗原の役割解明(2)

阐明非结核分枝杆菌特异性糖肽脂质抗原在细胞内感染中的作用（2）

• 批准号: 15H00598
• 负责人: 中 崇
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: 株式会社MBR
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15H00598/
• 关键词: 抗酸菌; glycopeptidolipid; 肺MAC症

【研究目的】肺MAC症は結核に類似した病変を生じ、非結核性抗酸菌症の重大な呼吸器疾患である。MAC菌は特異糖ペプチド脂質(GPL)抗原によって、28種類の血清型に分類されている。臨床分離株は、特定の血清型菌が強い病原性を示すことから、各血清型GPLと病原性の関連が示唆されているが、詳細な宿主応答機構は解明されていない。これまでに、MAC症臨床分離Kull株の天然型GPL(intact GPL, iGPL)6種のうち、アセチル(Ac)基が一つ付加したmono-Ac iGPLのみが、TLR2に認識されることから、細胞内感染Kull株は、Ac基によってGPL糖鎖を修飾し、TLR2感知から回避している可能性を示唆する知見を得た。さらに本研究では、細胞内感染時におけるiGPLの分子種動態変化を詳細に検証し、細胞内感染におけるMAC菌GPLの役割を解明することを目的とした。【研究方法】マクロファージ系細胞株にKull株を感染させ、経日的に回収した細胞内感染菌から総脂質を抽出し、MALDI/TOF MS分析によって、iGPLの分子種組成変化を解析した。【研究成果】細胞内感染菌では、感染4日後以降にdi-およびtri-Ac iGPLが増加傾向を示し、特にtri-Ac iGPLの増加が顕著であった。さらに感染菌では、構造未知のtri-Ac iGPLが感染後に継続的に増加し、非感染菌ではほとんど検出されない新たなiGPLを合成することが明らかとなった。このことから、細胞内感染菌はiGPLのAc基修飾に加えて、新たなiGPL合成により、iGPL分子種を多様化したことで、TLR2の認識回避を可能にした要因の一つであると考えられる。以上から、さらに天然型GPLのAc基転移酵素遺伝子や感染菌にのみ出現するiGPLの動態変化を追うことで、GPLと免疫回避の関係がより明確になると考えられる。

【 Research Objectives 】 Pulmonary MAC disease <s:1> tuberculosis に similar to the た disease を causing じ, nontuberculous acidosis causing major な respiratory disorders である. MAC bacteria <s:1> specific sugar ペプチド lipid (GPL) antigen によって, 28 types of <s:1> serotype に classification されて る る. Clinical isolates は, specific の serotype bacteria が strong い pathogenicity を shown す こ と か ら, each serotype GPL と pathogenicity の masato even が in stopping さ れ て い る が, detailed な 応 host a institutions は interpret さ れ て い な い. <s:1> れまでに, MAC disease clinical isolation of Kull strain <s:1> intact GPL(intact GPL) IGPL) 6 の う ち, ア セ チ ル (Ac) が つ pay and し た mono - Ac iGPL の み が, TLR2 に know さ れ る こ と か ら, infection of intracellular Kull strains は, Ac に よ っ て GPL lock を modified し sugar, TLR2 perception か ら avoid し て い を る possibility in stopping す る knowledge を た. さ ら に this study で は, infection in cells に お け る iGPL の molecules to describe the dynamic variations を detailed に 検 し, infection in cells に お け る MAC bacteria GPL cut を の service interpret す る こ と を purpose と し た. 【 methods 】 マ ク ロ フ ァ ー ジ system cell lines に Kull strains を infection さ せ, 経 に back 収 し た cells infected with bacteria か ら 総 lipid を drew し, MALDI/TOF MS analysis に よ っ て, iGPL の molecular species composition variations change を し た. 【 Research Results 】 Intracellular infected bacteria で で, after 4 days of infection, にdi-およびtri-Ac iGPLが increase tendency を, especially にtri-Ac iGPL <s:1> increase が顕 であった. さ ら に infection bacterium で は, tectonic unknown の tri - Ac iGPL が infection after に 継 続 に raised and し, non infected bacteria で は ほ と ん ど 検 out さ れ な い new た な iGPL を synthetic す る こ と が Ming ら か と な っ た. こ の こ と か ら, in cells infected with bacteria は iGPL の Ac based modified に plus え て, new た な iGPL synthetic に よ り, iGPL molecules of を others more し た こ と で, TLR2 の avoidance を may に し た by の a つ で あ る と exam え ら れ る. Above か ら, さ ら に type natural GPL の Ac base planning shift enzyme heritage 伝 son や infection bacterium に の み appear す る iGPL の dynamic variations を chase う こ と で, the GPL と immune evasion の masato is が よ り clear に な る と exam え ら れ る.