注射薬中に存在する重合開始剤による細胞傷害の機序解明

阐明注射药物中聚合引发剂引起的细胞损伤机制

• 批准号: 25928026
• 负责人: 山路 和彦
• 金额: $ 0.32万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-25928026/
• 关键词: 重合開始剤; 1-HCHPK; アポトーシス

【研究目的】現在までに, 我々は注射薬中に重合開始剤が混入していることを見出した。さらに, 検出して重合開始剤は, 高濃度領域でヒト末梢血単核球を有意に死滅させることも見出した。この一連の研究によって, 一部の重合開始剤による細胞死は, カスパーゼ3/7を介するアポトーシスが関与していることが示唆された。カスパーゼ3/7は, 主にデスレセプターを介して活性化されるカスパーゼ8, あるいはミトコンドリアを介して活性化されるカスパーゼ9により誘導される。そこで今回, 重合開始剤1-hydroxycyclohexyl phenyl ketone (1-HCHPK)によるアポトーシス誘導に対するカスパーゼ8および9の関与について検討した。【研究方法】ヒト末梢血単核球は, 同意取得した健常成人から末梢血を採取し分離した。細胞毒性試験は, 96穴プレートを用い, 細胞液(1×10^5 cells/well)に重合開始剤1-HCHPK (885 μM : IC_<50>)およびカスパーゼ8阻害薬Caspase-8nhibitorII(0.01-100 μM)あるいはカスパーゼ9阻害薬Caspase-9 InhibitorIII(0.01-100 μM)を添加し, 5%CO_2,37℃で培養した。24時間後, MTT溶液を加え3時間培養した。その後, 培養液を吸引除去しDMSOを加え, マイクロプレートリーダーを用いて吸光度を測定した。なお, 本研究は岡山大学大学院倫理委員会で承認を得て行った(承認番号 : 1026)。【研究成果】カスパーゼ9阻害薬添加群において, 10および100 μMで有意な(それぞれP<0.01)細胞生存率の上昇が認められた。一方, カスパーゼ8阻害薬添加群では, いずれの濃度域においても細胞生存率の上昇は認められなかった。本研究結果より, 重合開始剤1-HCHPKによるアポトーシスにはカスパーゼ9の経路が関与していることが明らかとなった。

[Objective] Now, I am going to inject the mixture into the mixture. In the meantime, the detection of the beginning of the overlap, the high concentration of the field of peripheral blood, the intentional death of the ball, the detection of the beginning of the overlap, the high concentration of the field of peripheral blood, the detection of the end of the overlap, the detection of the overlap, the detection of the end of the overlap, the detection of the overlap, the detection of the end of the overlap, the detection of the overlap, the detection of the end of the overlap, the detection, the detection of the end of the overlap, the detection, the detection of the end of the overlap. This study was conducted in conjunction with the study of cell death in a number of areas. 3/7, the main reason for the activation of the media, 8/7, the main reason for the activation of the media, 9/7 In this case, the coincidence starts with 1-hydroxycyclohexyl phenyl ketone (1-HCHPK). [Methods] Peripheral blood samples were collected from healthy adults and isolated. Cytotoxicity test: Cell solution (1×10^5 cells/well) was incubated with 1-HCHPK (885 μM : IC_<50>) or 8 inhibitor Caspase-8 inhibitor II (0.01-100 μM) or 9 inhibitor Caspase-9 inhibitor III (0.01 - 100 μ M) at 5%CO_2 at 37 ℃. After 24 hours, MTT solution was added and incubated for 3 hours. After that, the culture solution was removed by suction and the absorbance was measured. This study was approved by the Ethics Committee of Okayama University (Approval No.: 1026). [Results] The increase in cell survival rate was observed in the presence of 9 inhibitors at concentrations of 10 μM and 100 μM (P&lt;0.01). In one case, the increase in cell survival rate in the concentration range of 8-resistant additive groups was recognized. The results of this study indicate that the overlap between 1-HCHPK and 9-HCHPK is very important.

项目成果

重合開始剤1-hydroxycyclohexyl pheny ketoneによる細胞傷害に対するカスパーゼ経路の関与

Caspase途径参与聚合引发剂1-羟基环己基苯酮诱导的细胞损伤

• 发表时间: 2013
• 作者: 河崎 陽一;他
• 通讯作者: 他