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強拡大した精子頭部輪郭とDNA断片化の関連の検討

检查高度放大的精子头部轮廓与 DNA 碎片之间的关系

基本信息

批准号：
25931009
负责人：
宇津野宏樹
金额：
$ 0.38万
依托单位：
Shinshu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2014-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-25931009/
关键词：
顕微授精精子頭部形態精子DNA断片化

项目摘要

体外受精による出生数は年々増加しているが、採卵あたりの妊娠率は高くない。原因のひとつとして、精子のDNA断片化が考えられている。しかし、DNA断片化を調べるために固定した精子は体外受精に使用できない。そこで本研究は、生きた精子を6000倍以上に強拡大する技を利用して、DNAの健全性を示す形態指標の開発を目的とした。1. 高速で運動する精子の頭部形態測定法の開発。ディッシュに10% polyvinylpyrrolidone (PVP)を薄く広げ、ミネラルオイルで被膜することで、精子を常に同一方向から撮影可能とした。撮影した精子頭部は、楕円フーリエ解析と主成分分析により、4つの数値で表すことができた。数値化により、精子の頭部形態を客観的に評価可能とした。2. 精子の頭部形態とDNA断片化の関連。(1)合計125の精子を形態測定した後、そのDNA状態をTUNEL法で評価した結果、頭部の長幅比が平均値に近い精子や、頭部輪郭が角張っていない精子、また頭部に大きな空胞がない精子では、DNA断片化の可能性が低いことが示された。(2)50名の精子について、上記の形態指標の異常率とDNA断片化率の関連を調べた結果、有意な正の相関が見られた。これらの結果は、強拡大視野における精子頭部の長幅比や角張度合い、空胞の有無が、DNA断片化を予測する上で有用な形態指標であることを示唆している。この知見が、体外受精の成功率改善につながることが期待される。

In vitro fertilization, the number of births increases, and the pregnancy rate increases. The reason is that sperm DNA fragmentation occurs. DNA fragmentation, sperm fixation, and in vitro fertilization The purpose of this study is to develop morphological indicators of DNA integrity by using techniques that are more than 6000 times stronger than those of sperm. 1. Development of a method for determining sperm head morphology during high speed motility. 10% polyvinyl pyrrolidone (PVP) is a thin film that can be detected in the same direction as sperm. The analysis of sperm head, sperm size and principal component analysis showed that the number of sperm was higher than that of sperm head. The number of sperm, sperm and head morphology, and the number of sperm. 2. Relationship between sperm head morphology and DNA fragmentation. (1)Total of 125 sperm morphology measurements, DNA status evaluation results by TUNEL method, average head length/width ratio, sperm size, sperm size, and DNA fragmentation were low. (2)50 The correlation between abnormal rate and DNA fragmentation rate of sperm and sperm was analyzed. The results showed that the length ratio of sperm head, angular expansion, presence or absence of empty cells and DNA fragmentation were useful morphological indicators. The success rate of IVF is expected to improve.