FSH受容体多型解析による個別化治療の可能性

通过 FSH 受体多态性分析实现个性化治疗的可能性

• 批准号: 25931044
• 负责人: 松田 弘子
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-25931044/
• 关键词: 不妊治療; FSH受容体多型; 個別治療

現在、不妊治療の過程において排卵誘発剤のゴナドトロピン製剤の必要量が個人によって異なることが報告されている。FSH受容体の中で3種のアミノ酸多型が判明しており、その中には不妊治療との相関でFSH製剤に感受性の低い型も報告されている。不妊治療の患者さん血液よりFSH受容体多型を解析し、さらに受容体の型の違いによる機能の相違をin vitro実験で調べ、構造上の違いによる機能の変化を検討することにより、よりきめ細かい不妊の個別化治療の確立の可能性に寄与することを目的とした。方法として、患者血液よりDNAを抽出し、設定したプライマーによりPCR増幅してシークエンスを調べる。シークエンスで同定された多型の組み合わせをPCRで合成し、発現ベクターに導入してプラスミドを作成する。作成した多型変異プラスミドを293ce11に導入し、ウェスタン・プロットによる蛋白発現量、FSHを作用させた時の細胞中cAMP量を測定して変異の違いによる発現量の検討を行う。これらの結果、当科の患者血液129検体中、3種のアミノ酸多型(codon307, codon680)①Thr/Thr, Asn/Asn②Ala/Thr, Ser/Asn③Ala/Ala, Ser/Serの出現頻度は5:4 : 1程度であった。1割の③Ala/Ala, Ser/SerにFSH製剤の感受性が低いことが既に報告されている。変異プラスミドでのウェスタン・ブロットの結果では、①Thr/Thr, Asn/Asnより③Ala/Ala, Ser/Serの蛋白発現量が低いことが認められた。cAMP発現量に関してはFSH製剤感受性の低い③Ala/Ala, Ser/Serに低めの傾向が見られるが、現段階で明らかな有意差があるとはいえない状況である。これらの実験は引き続き検討を重ねる必要がある。当科不妊外来のPCOSの患者さんでは、③Ala/Ala, Ser/Serの型は存在せず、codon680にSerを含む患者さんが少ない傾向にあったので、今後症例数を増やして検討する予定である。

At present, during the process of non-pregnancy treatment, ovulation, pregnancy, ovulation, ovulation, pregnancy, ovulation, ovulation, The three types of acid polymorphisms in FSH recipients were identified as mild, moderate, low susceptibility, low susceptibility and low susceptibility. In patients with pregnancy-free pregnancy, the blood FSH receptor polymorphisms were analyzed, the capacitive body types were analyzed, and the mechanism was used to determine the possibility of in vitro treatment. Methods the patients' blood samples were extracted by DNA, and the PCR was set. In the same way, the multi-type system is used to synthesize PCR, and it is possible to make the system. As a result, the amount of 293ce11 input, the amount of protein in the cell, and the amount of cAMP in the cell of the cell were measured. The concentration of cAMP was measured. The results showed that three kinds of codon307, codon680 (1Thr/Thr), Asn/Asn2Ala/Thr, Ser/Asn3Ala/Ala and Ser/Ser were found in the blood of the patients, and the degree was 5:4: 1. 1. 3Ala/Ala, Ser/Ser, FSH, sensitivity, low sensitivity. The results showed that 1Thr/Thr, Asn/Asn protein and Ser/Ser protein levels were low and low. CAMP measurement, FSH sensitivity, low 3Ala/Ala, Ser/Ser, low sensitivity, low sensitivity, low sensitivity, Please tell me that you have to pay attention to the necessary information. When the patients with pregnancy-free PCOS, 3Ala/Ala, Ser/ serotype, and codon680 serotype were diagnosed, the number of cases was predetermined, and the number of cases was predetermined.