FSH受容体多型解析による個別化治療の可能性

通过 FSH 受体多态性分析实现个性化治疗的可能性

基本信息

  • 批准号:
    25931044
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.38万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
  • 财政年份:
    2013
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2013-04-01 至 2014-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

現在、不妊治療の過程において排卵誘発剤のゴナドトロピン製剤の必要量が個人によって異なることが報告されている。FSH受容体の中で3種のアミノ酸多型が判明しており、その中には不妊治療との相関でFSH製剤に感受性の低い型も報告されている。不妊治療の患者さん血液よりFSH受容体多型を解析し、さらに受容体の型の違いによる機能の相違をin vitro実験で調べ、構造上の違いによる機能の変化を検討することにより、よりきめ細かい不妊の個別化治療の確立の可能性に寄与することを目的とした。方法として、患者血液よりDNAを抽出し、設定したプライマーによりPCR増幅してシークエンスを調べる。シークエンスで同定された多型の組み合わせをPCRで合成し、発現ベクターに導入してプラスミドを作成する。作成した多型変異プラスミドを293ce11に導入し、ウェスタン・プロットによる蛋白発現量、FSHを作用させた時の細胞中cAMP量を測定して変異の違いによる発現量の検討を行う。これらの結果、当科の患者血液129検体中、3種のアミノ酸多型(codon307, codon680)①Thr/Thr, Asn/Asn②Ala/Thr, Ser/Asn③Ala/Ala, Ser/Serの出現頻度は5:4 : 1程度であった。1割の③Ala/Ala, Ser/SerにFSH製剤の感受性が低いことが既に報告されている。変異プラスミドでのウェスタン・ブロットの結果では、①Thr/Thr, Asn/Asnより③Ala/Ala, Ser/Serの蛋白発現量が低いことが認められた。cAMP発現量に関してはFSH製剤感受性の低い③Ala/Ala, Ser/Serに低めの傾向が見られるが、現段階で明らかな有意差があるとはいえない状況である。これらの実験は引き続き検討を重ねる必要がある。当科不妊外来のPCOSの患者さんでは、③Ala/Ala, Ser/Serの型は存在せず、codon680にSerを含む患者さんが少ない傾向にあったので、今後症例数を増やして検討する予定である。
Now, is not a perfect treatment process の に お い て induced ovulation 発 tonic の ゴ ナ ド ト ロ ピ ン system quantity が tonic の necessary personal に よ っ て different な る こ と が report さ れ て い る. FSH in the capacity of body の で 3 kinds of の ア ミ ノ acid polymorphism が.at し て お り, そ の in に は not perfect treatment と の phase masato で FSH system tonic に susceptibility の low い も report さ れ て い る. in the treatment of infertile <s:1> patients, さん blood よ <s:1> FSH receptor polymorphism を analysis of <s:1> and さらに receptor <s:1> type <s:1> violation of <s:1> による による function <e:1> violation をin Vitro be 験 で べ, structural の violations い に よ の る function - the を beg す 検 る こ と に よ り, よ り き め fine か い don't stretch marks の individualized treatment の に send の possibility and す る こ と を purpose と し た. Methods と し て, patient blood よ り を DNA extraction し, setting し た プ ラ イ マ ー に よ り PCR rights of し て シ ー ク エ ン ス を adjustable べ る. シ ー ク エ ン ス で with fixed さ れ た type の group み multiplexing わ せ を PCR で synthetic し, 発 now ベ ク タ ー に import し て プ ラ ス ミ ド を made す る. Make し た polymorphism - different プ ラ ス ミ ド を 293 ce11 に import し, ウ ェ ス タ ン · プ ロ ッ ト に よ る protein 発 now quantity, FSH を さ せ cAMP quantity を の cells to determine when た し て - different の violations い に よ る 発 amount is の う beg を 検 line. The frequency of occurrence of three types of <s:1> ア ノ ノ ノ acid polymorphs (codon307, codon680)①Thr/Thr, Asn/Asn②Ala/Thr, Ser/Asn③Ala/Ala, Ser/Ser <s:1> in 129検 bodies of the blood of patients with <s:1> in the same department is 検 5:4: 1 degree であった. 1. <s:1> ③Ala/Ala, Ser/SerにFSH inhibitor <s:1> sensitivity が low とが とが に report されて されて る る る. - different プ ラ ス ミ ド で の ウ ェ ス タ ン · ブ ロ ッ ト の results で は, (1) Thr/Thr, the Asn/Asn よ り (Ala/Ala, Ser/Ser の low protein 発 now quantity が い こ と が recognize め ら れ た. CAMP 発 now quantity に masato し て は FSH system tonic sensitivity low の い (3) Ala/Ala, Ser/Ser に low め の tendency が see ら れ る が, now Duan Jie で Ming ら か な deliberately bad が あ る と は い え な い condition で あ る. Youdaoplaceholder5 れら <s:1> experiment れら citation 続 続 検 検 検 discussion を importance ねる necessity がある. When the family is not a perfect foreign の patients with PCOS の さ ん で は, (3) Ala/Ala, Ser/Ser の type は exist せ ず, codon680 に Ser を contains む patient さ ん が less な い tendency に あ っ た の で, future cases を raised や し て beg す 検 る designated で あ る.

项目成果

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