石灰化大動脈弁患者の術前・術後血清を用いての疾患バイオマーカーの網羅的探索

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1. 研究目的心血管疾患の一つである石灰化大動脈弁狭窄症患者における血清バイオマーカー蛋白質を同定し、大動脈弁石灰化の診断法への応用を目指した。2. 研究方法大動脈弁石灰化を伴った大動脈弁狭窄症等の患者から採血した弁置換手術前・術後の血清と健常人(ボランティア)血清(コントロール)を用いて、isobaric tag for relative and absolute quantitation(iTRAQ)試薬による標識とその後のナノ液体クロマトグラフ(LC)装置による分離及びマトリックス支援レーザー脱離イオン化飛行時間型タンデム質量分析装置(MALDI-TOF/TOF MS/MS)を用いての解析により、術前に比べ術後において発現差異を示す血清蛋白質のプロテオミクス解析を行った。3. 研究成果石灰化大動脈弁狭窄症患者血清において術前に比べ術後で発現差異のある51個の蛋白質を同定し、このうち16個がコントロール血清との比較でも発現量に有意差を示した。これらの多くはacute-phase proteinであったが、acute-phase protein以外のもののうち、術前血清に比べ術後血清において、antithrombin-Ⅲでは1.68倍、zinc-α-2-glycoproteinでは1.51倍、α-1B-glycoproteinでは1.30倍の上昇がみられた。また、16個の蛋白質のうちfibronectinのみが術後血清において減少がみられた。この蛋白質はnegative acute-phase proteinとして知られており、コントロール血清においては検出されなかった。さらに、いくつかの蛋白質については、ウエスタンブロット法を用いてプロテオミクス解析の結果の確認を行った。今回、石灰化大動脈弁の手術前後において発現差異を示すいくつかの血清蛋白質が同定できたが、これらの蛋白は大動脈弁石灰化の発生機序の解明や診断法への応用において、その有用性が期待できる。