酸化コレステロールが増悪させる脂肪性肝炎・インスリン抵抗性の機序解明

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【目的】これまでの研究で、サルにおいては酸化コレステロールが通常のコレステロールに比べ、脂肪肝炎を悪化させることが考えられたが、その機序については詳細な検討が行われてこなかった。当研究ではその一端として、食事由来の酸化コレステロールが特異的に引き起こす小腸上皮細胞や肝細胞における反応を通常の(コントロール)コレステロールと比較することで、脂肪肝炎を悪化させる機序の解明を目的とする。【研究方法】マウス(C57BL/6J雄、7週令)にHigh Fat Dietを給餌、コントロールコレステロールと酸化コレステロールを2.4mg/dayミセルにして隔日強制経口投与した。4週間後、採血、臓器を採取した。肝臓は脂質を抽出し、また血液も血清を分離後、TC, TGを測定した。肝臓は凍結切片を作成し、Oil red O染色にて脂肪滴を観察した。肝培養細胞(Huh7)および腸管上皮培養細胞(Caco2)はミセルにしたコントロールコレステロール、酸化コレステロールで各400ug/mL2時間刺激をし、炎症性因子関連遺伝子、脂質代謝関連遺伝子などの発現を比較した。【研究成果】両群のマウスでは体重、肝重量には有意差は見られなかった。また両群共に肝臓に多くの脂肪滴がみられ、組織学的に脂肪肝が形成されていた。肝臓の脂質量ではTCが両群に差が見られなかったのに対し、TGは酸化コレステロール群が有意に上昇していた(約1.85倍対コントロール、P=0.0159)。一方血清中のTC、TGの量には共に差が見られなかった。今回、コントロールコレステロール、酸化コレステロール両ミセル2時間処理では、Caco2におけるコレステロール吸収に関与する遺伝子発現に有意な変化はみられなかった。また、Huh7における脂質代謝系遺伝子にもコレステロールの違いによる差をみることはできなかった。【結論と展望】今回マウスにおいて、食餌性のコレステロールが酸化した物であると、肝臓により脂肪を蓄積しやすいということが確認できた。この時、血中のTCやTGには量的変化はみられなかった。しかし、血中の脂質には質的変化がある可能性が残されており、今後詳しく調べていく必要がある。また、今後は脂肪肝炎の炎症の症状が酸化コレステロールにより悪化するのかさらに確認したい。培養細胞による機序解明においても、短時間の単回刺激によっては、吸収や代謝に目立った変化は確認できなかったため、さらなる精査が必要となる。